囊素五肽对人肺成纤维细胞细胞外基质及转化生长因子β1／Smad信号通路的影响研究.pdf

· 158· ChinJRespirCritCareMed，March2013，Vo1．12，No．2 http：／／www．cjFocm．toni 论 著 · 囊素五肽对人肺成纤维细胞细胞外基质及 转化生长因子 I3，／Smad信号通路的影响 曾雪华 张德平 南京大学医学院附属鼓楼医院呼吸内科 (江苏南京 210008) 【摘要】 目的 观察囊素五肽(BP5)对转化生长因子 p(TGF—p)刺激的人肺成纤维细胞分泌 的细胞外基质以及对转化生长一B。／Smad信号通路的影响，探讨囊素五肽抗肺纤维化的机制。方法 HLF细胞分为阴性对照组、TGF．13刺激组 、TGF一31，+BP5药物干预组 (三组均用TGF-B。刺激后分别 使用不同浓度 BP52．5、5及 1O g／mL进行干预)。免疫荧光法测定细胞 仪平滑肌肌动蛋 白(0一【 SMA)的表达，Westernblot方法检测 collagen—I、p-Smad2／3、p-Smad3和 Smad7蛋白的表达。结果 TGF—B。刺激细胞经免疫荧光标记显示 仅．SMA阳性表达，说明人肺成纤维细胞在TGF-B。刺激下转化 为肌成纤维细胞(MF)，TGF．B．刺激同时加BP5不同药物浓度组中，1O g／mL的BP5药物浓度能显 著减少细胞增殖转化。经TGF一31刺激后，人肺成纤维细胞 collagen—I[(1．402±0．158)比(0．605± 0．367)]、p-Smad2／3[(1．457±0．111)比(0．815±0．039)]、P—smad3[(1．320±0．147)比(0．623 ±0．128)]蛋白表达较刺激前表达明显增多(P0．01)，Smad7表达较对照组降低[(0．613-4．0．107) 比(0．865±0．063)，P0．05)]；与TGF—B，处理组相比，BP5可抑制由TGF—pl刺激人肺成纤维细胞 弓I起的collagen—I蛋 白[(0．718±0．049)比(1．402±0．t58)]、p-Smad2／3[(0．696-4．0．031)比 (1．457±0．111)]p-Smad3[(0．766±0．006)比(1．320-4-0．147)]表达上调 (P均0．01)，而Smad7 的蛋白表达明显增加 [(1．237±0．173)比(0．614±0．107)，P0．05]。结论 BP5可能通过抑制 TGF—p，／Smads信号通路激活，下调TGF-B。刺激下人肺成纤维细胞的collagen-I及 ot—SMA蛋 白的表 达，提示BP5可能对肺纤维化具有一定的干预作用。 【关键词】 囊素五肽；肺纤维化；肺成纤维细胞；转化生长因子B。； Smad蛋白质类 BursopentinReducesExpressionofExtracellularMatrix in HumanLungFibroblastsbyMediating TGF· ／SmadSignalingPathway ZENG Xue—hua，ZHANG De-ping．DepartmentofRespiratory Medicine，TheAffiliatedDrumTowerHospital，NanjingUniversityMedicalCollege．Naming，Jiangsu，210008， China CorrespondingAuthor：ZHANGDe-ping，E—mail：dpzhang207@yahoo．com．cn A【bstract】 Objective Toinvestigatetheeffectsofbursopentin (BP5)onexpressionof extracellularmatrixinhumanlungfibroblasts(HLFs)anditsmechanism．Methods HLFswerecuhured invitroanddividedintofivegroups．ThecellsinthecontrolgroupwereculturedinDMEMwithoutTGF—B， orBP5．ThecellsinTGB一311treatmentgroupwerecuhuredinDMEMcontaining5 LTGF·B1．Whilein threeTGF—Bl+BP5treat