电针对胰源性肺损伤保护作用机制的研究.docVIP

精品论文 参考文献 电针对胰源性肺损伤保护作用机制的研究 （1解放军181中心医院神经康复科 广西 桂林 541002） 　　（2桂林医学院附属医院中医科 广西 桂林 541002） 　　（3桂林医学院药学部 广西 桂林 541002） 　　【摘要】 目的：探讨电针“天枢”穴对胰源性肺损伤保护作用机制。方法：随机选取2014年1月至2016年饲养的30只健康清洁级SD大鼠建立SD大鼠胰源性肺损伤模型。并将造模成功的大鼠随机分为模型组、电针组、假手术组共三组，每组10只。以电针天枢穴治疗为电针组，以针药结合治疗（给予地塞米松的同时辅以电针干预）为假手术组，比较三组治疗效果，明确电针疗法的辅助治疗作用。三组分别留取肺组织进行肺水含量检测，免疫组织化学法检测肺组织中TNF-alpha;与AQP-1表达情况，比较三组疗效差异。结果：AQP-1与TNF-alpha;在正常肺组织及胰源性肺损伤肺组织中均存在表达，但在胰源性肺损伤肺组织中的表达水平显著高于正常肺组织，电针能影响AQP-1的表达。通过免疫组织化学法检测血清TNF-alpha;和肺微血管内皮组织AQP-1含量比较为模型组gt;电针组gt;假手术组，差异具有统计学意义（P＜0.05)。结论：电针天枢穴对胰源性肺损伤可起到较好的保护作用。 　　【关键词】电针；胰源性肺损伤；作用机制 　　【中图分类号】R493 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）35-0050-02 　　急性肺损伤是一种失控的炎症反应[1]，以肺血管内皮细胞及肺泡上皮细胞广泛损伤为病理特征，是急性呼吸窘迫综合征的早期阶段，临床上表现为肺部弥漫性渗出和难以用单纯吸氧纠正的低氧血症。急性肺损伤可以看作是全身炎症反应综合征的肺部表现。在重型急性胰腺炎引起的全身炎症反应综合征中，以急性肺损伤发生率为高且出现最早[2]。肿瘤坏死因子(TNF alpha;)与水通肺损伤道蛋白-1(AQP-1）在急性发病机制中起重要的作用。中医理论认为，肺与大肠相表里，五行皆属金。肺为娇脏，阳明腑实，大便不通，极易导致肺失宣降而致肺脏损伤。天枢穴属于足阳明胃经，为大肠的募穴，“腑病取募”，天枢穴有疏调肠腑、理气通便作用，充分发挥中医针灸学特色优势，发挥整体调节的综合作用，采用现代分子生物学方法阐明TNF-alpha;与AQP-1在胰源性肺损伤的相互作用关系，明确电针治疗保护作用的机制，为今后加强针灸在内科急腹症中的辅助治疗工作的开展，具有重要的研究意义。 　　1.材料与方法 　　1.1 实验动物与分组 　　随机选取30只于2014年1月至2016年6月饲养的健康清洁级SD大鼠建立胰原性肺损伤模型，均建立成功，平均体重(100～120）g,将这30只模型大鼠随机分为模型组、电针组、假手术组共三组，每组10只。 　　1.2 建模方法 　　实验大鼠均分笼饲养于适宜的环境（16～25摄氏度，相对湿度50%～70%，清洁安静）术前动物禁食12h，不禁水，20g/L水合氯醛腹腔注射麻醉，动物腹部剃毛，消毒术区皮肤，无菌条件下经正中切口入腹，在十二指肠乳头对侧肠壁插入1ml小注射器针头经胰腺胆管十二指肠乳头开口入胰胆管，同时在胆管出肝门处用小动脉夹夹闭，逆行注入15g/L 熊去氧胆酸钠（1ml/kg）30s注射完毕。 　　1.3 实验方法 　　模型组于造模后8h剖杀[3]，提取肺组织，检测肺水含量，免疫组织化学法检测肺组织中AQP-1与TNF-alpha;表达情况，Westernblot法检测肺组织中AQP-1蛋白的表达水平。电针组和假手术组电针双侧“天枢”穴。“天枢”穴定位采用拟人比照法，取大鼠胸腹正中线上，以剑突为一定位点，以耻骨联合上缘为另一定位点，两者连线的上2/3与下1/3的交点处旁开5mm为“天枢”穴。用特制鼠架将大鼠固定后，穴位周围剪去腹毛，皮肤常规消毒，用毫针针刺5mm深，接HANS-200A型电针仪，电流强度为0.8～1.3mA，采用疏密波，2Hz/15 Hz，治疗15min后剖杀，提取肺组织，免疫组织化学法检测肺组织中TNF-alpha;AQP-1表达情况。 　　1.4 免疫组织化学检测方法 　　1）抗原的提取与纯化；2）免疫动物或细胞融合，制备特异性抗体以及抗体的纯化；3）将显色剂与抗体结合形成标记抗体；4）标本的制备；5）免疫细胞学反应以及呈色反应；6）观察结果。 　　1.5 统计学处理 　　所有数据均采用SPSS 17.0软件进行统计分析，计量资料应用平均值plusmn;标准差(x-plusmn;s)，计量资料采用t检验，计数资料以百分率（%）表示，采用chi;2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。