多氯联苯对非洲爪蟾变态发育的影响研讨.pdf

多氯联苯对非洲爪蟾变态发育的影响研究 周景明+秦占芬徐晓白 (中国科学院生态环境研究中心北京100085) 摘要：甲状腺激素干扰物是一类重要的内分泌干扰物，本论文将非洲爪蟾从受精卵开始 u v u 直到变态结束，暴露在一定浓度(0，400ng／L,2g／L，10g／k，20g／U)的多氯 u 变态所需的时间，2 g／L以上的浓度即可使甲状腺组织发生明显的组织学改变，提示 多氯联苯可干扰非洲爪蟾的变态发育，甲状腺组织学改变，尤其是用定量组织病理学技 术检测甲状腺激素干扰物较为灵敏，方法简单易行，是一种切实可行的体内筛选和确证 方法。 关键词：多氯联苯非洲爪蟾变态内分泌干扰物甲状腺激素干扰物 环境雌激素是最早引起人们关注也是研究昂多的一类内分泌干扰物，近年来发现许 多环境化合物如铅、锰、铊等重金属、高氯酸盐以及多卤代劳烃类等可干扰甲状腺素系 统．表现发育和行为异常，甲状腺激素干扰物已成为继环境雌激素之后的另一类重要的 内分泌干扰物。 甲状腺作为人和动物重要的内分泌器官，在促进机体的基础代谢、生长和发育等方 面至关重要，另外，甲状腺激素还直接控制两栖动物的变态…。PCBs作为一种在环境普 遍存在的持久性有机污染物，具有广泛的内分泌干扰作用，既可干扰雌激素系统又可干 扰甲状腺激素系统的功能4”．文献报道PcBs对甲状腺素系统的干扰作用比其对雌激素 系统的干扰作用要强的多，几乎所有的PCBs混合物和同类物都可干扰甲状腺系统的自 身稳态“1．但大部分PCBs对甲状腺素干扰的报道都来自试验动物(大鼠、小鼠、狨猴 等)单剂量短期暴露PCB同类物或混合物的结果…。 近20年来，世界范围内两栖类种类和种群数目减少而畸形青蛙的增加，包括PcBs 在内的工农业化学污染物也被怀疑为可疑的原因之一”“，但有关PCBs对两栖类的影响 的研究少有报道””1。而且美国内分泌干扰物筛查和确证顾问委员会(EDSTAC)建议将非 洲爪蟾用作评价化合物干扰甲状腺激素的实验动物”“。 无尾两栖类的变态发育可分为三个时期：从受精卵到后腿出现为变态早期 climax)。为了更好的模拟自然暴露的 展开到尾巴完全吸收为变态高峰期(metamorphic 条件．在本试验中，从受精开始一直到变态完全结束，非洲爪蟾暴露低浓度的PCBs，检 测PCBs长期暴露对非洲爪蟾蝌蚪变态发育的影响；另一方面，也为非洲爪蟾这一模型 动物在筛选和确证甲状腺素干扰物中的应用探索一些可行的检测终点。 127 1材料与方法 1．1试验动物；成年非洲爪蟾雌雄各半(购自中国科学院发育与遗传研究所)． I．2所需仪器、设备与试帮：Aroclor 腺激素(hoG)(上海第一生化药业有限公司)、组织切片机、普通光学显徼镜，显 微图像处理分析系统． I．3试验方法： 1．3．1诱导挥卵在室温20℃左右时，晚上给适繁雌、雄蛙腹腔内分别注射hCG(雄蛙 500 IU,雌蛙1000IU)．注射后置于盛有FETAX溶液的桶中(F砑Ax溶液的配制参见参 考文献13)，距桶底15∞处放置一个孔径合适的网筛，约2小时后雌雄合抱，次日晨 开始产卵．排卵后结束后。包围胚胎的凝胶物质用器(w／v)半胱氨酸溶液除去，轻轻 搅拌3-4rain．用FETAX溶液漂洗3_4次后，在显微镜下镜检。第一次镜检除去卵裂异 常胚胎和坏死的胚胎，第二次镜检以保证只有正常发育到第8—11期的胚胎用于试验． 1．3．2动物暴露和试验方法每个培养皿(直径60m)内放30只经过两次抵选的发育正 p 常胚胎，暴露在0．400ng几2Pg／L，10Pg／L，20g／L的A-1254溶液中·每组 h后- 设4个重复，每24h换液一次，换液的同时记录孵化率、畸形率和死亡率．96 每组挑选30只发育正常的蝌蚪。移入盛有18_L经沙炭滤拄过滤，充分曝气的自来水中。 每组加入相应剂量的A-1254混匀，每3d换液1次，每日