琥珀酸脱氢酶或琥珀酰辅酶A合成酶缺失促进大肠杆.PDFVIP

1494 蒲伟 等/琥珀酸脱氢酶或琥珀酰辅酶A 合成酶缺失促进大肠杆菌积累5-氨基乙酰丙酸 生 物 工 程 学 报 Chinese Journal of Biotechnology October 25, 2013, 29(10): 1494−1503 /cjbcn ©2013 Chin J Biotech, All rights reserved 研究报告 琥珀酸脱氢酶或琥珀酰辅酶A 合成酶缺失促进大肠杆 菌积累5-氨基乙酰丙酸 1,2,3 2,3 2,3 1 2,3 2,3 2 蒲伟 ，陈久洲 ，孙村民 ，陈宁 ，孙际宾 ，郑平 ，马延和 1 天津科技大学 生物工程学院，天津 300457 2 中国科学院 天津工业生物技术研究所，天津 300308 3 中国科学院 系统微生物工程重点实验室，天津 300308 蒲伟, 陈久洲, 孙村民, 等. 琥珀酸脱氢酶或琥珀酰辅酶A 合成酶缺失促进大肠杆菌积累5-氨基乙酰丙酸. 生物工程学 报, 2013, 29(10): 1494−1503. Pu W, Chen JZ, Sun CM, et al. Deficiency of succinic dehydrogenase or succinyl-CoA synthetase enhances the production of 5-aminolevulinic acid in recombinant Escherichia coli . Chin J Biotech, 2013, 29(10): 1494−1503. 摘 要: 5-氨基乙酰丙酸 (ALA) 是生物体内四吡咯类化合物的合成前体，在农业及医药领域应用广泛，是极 具开发价值的高附加值生物基化学品。目前利用外源 C4 途径的重组大肠杆菌发酵生产 ALA 的研究主要利用 LB 培养基并添加葡萄糖和琥珀酸、甘氨酸等合成前体，成本较高。琥珀酸在 C4 途径中以琥珀酰辅酶A 的形 式直接参与ALA 的合成。文中在以葡萄糖为主要碳源的无机盐培养基中研究了琥珀酰辅酶A 下游代谢途径琥 珀酸脱氢酶编码基因sdhAB 和琥珀酰辅酶A 合成酶编码基因 sucCD 缺失对 ALA 积累的影响。与仅表达异源 ALA 合成酶的对照菌株相比，sdhAB 和 sucCD 缺失菌株 ALA 的产量分别提高了25.59%和 12.40%，且ALA 的积累不依赖于琥珀酸的添加和LB 培养基的使用，从而大幅降低了生产成本，显示出良好的工业应用前景。 关键词: 5-氨基乙酰丙酸，琥珀酸脱氢酶，琥珀酰辅酶A 合成酶，大肠杆菌，基因敲除 Received: July 1, 2013; Accepted: August 5, 2013 Supported by: National Natural Science Foundation of China (No., Knowledge Innovation Program of the Chinese Academy of Sciences (No. KSCX2-E-W-Q-13), Key Projects in the Tianjin Science Technology Pillar Program (No. 11ZCZDSY08500). Corresponding author: Ping Zheng. Tel/Fax: +86-22 E-mail: zheng_p@ 国家自然科学基金 (No. ，中国科学院知识创新工程项目 (No. KSCX2-E-W-Q-13) ，天津市科技支撑计划重大项目 (No.