反相高效液相色谱法测定利巴韦林葡萄糖注射液的含量和有关物质研究.pdfVIP

反相高效液相色谱法测定 利巴韦林葡萄糖注射液的含量和有关物质 刘 放 孙洁胤 周芝芳 3) (浙江省医学科学院药物研究所杭州31001 摘 要：目的：建立了利巴韦林葡萄糖注射液的含量和有关物质的反相高效液相色谱法。方法：采用 DIAMONSIL 0．1ng，控制总杂质量不得过1．0％。结论：本法简便、快速、准确，适用于利巴韦林及其制剂的质量控制。 关键词：利巴韦林；利巴韦林葡萄糖注射液；有关物质；反相高效液相色谱法 (IMP)脱氢酶抑制剂，抑制IMP，从而阻碍病毒核苷酸的合成，具有广谱抗病毒性能，对多 种病毒如呼吸道合胞病毒、流感病毒、单纯疱疹病毒等有抑制作用。对流感(由流感病毒A 和B引起)、腺病毒肺炎、甲型肝炎、疱疹、麻疹等有防治作用。国内临床试验已证实其对流 行性出血热有效，对早期患者疗效明显，有降低死亡率、减轻肾损害、降低出血倾向、改善全 身症状的作用n]，中国药典2005年版已收载利巴韦林及其制剂。本文参考相关文献[2～93， 采用反相高效液相色谱法，可以快速、准确地对利巴韦林葡萄糖注射液的含量和有关物质 进行测定。 1仪器与试剂 1．1 仪器 Shimadzu 有限责任公司)。 1．2试剂 0．59与葡萄糖12．59，由广西富裕药业有限公司提供)。 · 97· 2结果与讨论 2．1利巴韦林紫外吸收光谱 取利巴韦林对照品适量，用水稀释成约15／zg·ml叫的溶液，以水为参比，lcm比色杯， 207nm波长处吸收最大。 2．2 色谱条件与系统适用性试验 ，检 测波长：207nm，柱温：室温，灵敏度：0．05AUFS，进样量：20“l，理论塔板数按利巴韦林峰 计算应不低于3000。 2．3方法学考察 2．3．1 回收率试验精密称取利巴韦林对照品约80、120、120mg，置50ml容量瓶中， 分别加注射用葡萄糖2．59，用流动相溶解并稀释至刻度，分别吸取上述溶液适量，用流动 注入液相色谱仪，记录色谱图；另取利巴韦林对照品，用流动相定量稀释成每lml约含 40／-g的溶液同法测定，计算每份的回收率。结果表明：本法的方法回收率在98．44％～ 99．97％之间，RSD均小于0．65％。 加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，分别进样测定含量。结果表明：本法方法稳定， RSD=0．49％。 加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，于同日内及不同日内分别进样测定5次，得到日 内和日间精密度，分别为0．02％和0．34％，方法的精密度良好。 2．3．4方法专属性取利巴韦林葡萄糖注射液破坏性试验样品，分别用酸破坏 峰、降解产物峰与利巴韦林均有较好的分离，分离度均1．5。酸、碱、氧化破坏极为明显， 光照样品杂质峰较为明显，温度对样．品影响不大。 2．3．5 方法的灵敏度试验和最低检测限 取利巴韦林对照品适量，加水稀释成含利 的溶液，各取20肚l注入高效液相色谱仪。结果显示：本法灵敏度完全可以检出供试液中浓 度大于0．1％的杂质。以信噪比为3(S／N=3)计算，测得利巴韦林的最低检测限为0．1ng。 2．4样品的测定 2．4．1标准曲线绘制 精密称取利巴韦林对照品约40mg，置100ml容量瓶中，加水 61．32／ag·ml_1的系列溶液，分别量取20扯l，注入液相色谱仪，记录色谱图，量取峰面积，经 线性回归后得回归方程：A一10621．72C+5574．31，，．一0．9996。 2．4．2利巴韦林葡萄糖注射液中利巴韦林含量测定 取本品六批(030110，030111， · · 98 度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取20ttl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取干燥至恒重 的利巴韦林对照品，精密称取适量，用水制成每lml中约含利巴韦林40ttg的溶液，同法测 定，按外标法的计算结果见表1。 表1 利巴韦林葡萄糖注射液含量和有关物质测定结果 2．5．2利巴韦林葡萄糖注射液中有关物质测定取