分子生物学导论-分子生物学研究方法(3).pptVIP

第七节 核酸序列分析技术 第八节 转基因技术 第十节 蛋白组学及其研究技术 课程回顾 2. 双元载体系统 双元载体系统是指两个分别含有T-DNA和Vir区的相容性突变Ti质粒构成的双质粒系统，由于其T-DNA和Vir区在两个独立的质粒上，通过反式激活T-DNA转移，故又称为反式载体。 一元载体(顺式载体) 双元载体(反式载体) 二、受体材料的选择 受体是指用于接受外源DNA的转化材料。 良好的植物基因转化受体系统应满足如下条件： 1. 高效稳定的再生能力； 2. 受体材料要有较高的遗传稳定性； 3. 外植体来源方便，如胚和其它器官等； 4. 对筛选剂敏感； 5. 转化率高。 常用的受体材料有以下几大类型: 1. 愈伤组织再生系统 外植体材料经过脱分化培养诱导形成愈伤组织，转化(带有目的基因质粒的农杆菌侵染)，分化培养获得再生植株。 优点：外植体来源广，繁殖快，易接受外源基因， 转化效率高。 缺点：遗传稳定性差、嵌合体 因此需要连续的再生系统 2. 直接分化再生系统 外植体材料细胞不经过脱分化形成愈伤组织阶段，而是直接分化出不定芽形成再生植株。 优点：周期短、操作简单，体细胞变异小，遗传稳定； 缺点：材料局限，转化率低。