现代生物工程技术(吉林大学)现代生物工程技术-部分整理.docVIP

现代生物工程技术(吉林大学)现代生物工程技术-部分整理.doc

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现代生物工程技术 考试题型: 名词解释,2题,每题5分 单选,10题,每题1分 多选,10题,每题2分 简答,6题,每题5分 论述,3题,每题10分 老外课程重点:14页表一,,, 15页表二 16页表三 23页制药分区概念 其他重点内容: 生物制品分类 生物制品学是指研究各类生物制品的来源,结构特点,应用,生产工艺,原理,现状,存在问题与发展前景等诸方面知识的一门科学 分类:按结构和功能分: 1疫苗类:1、疫苗:灭活疫苗,减毒活疫苗,亚单位疫苗或组分苗,基因工程疫苗,遗传重组疫苗,合成肽疫苗,抗独特型抗体疫苗2、细菌疫苗:灭活菌苗,减毒活菌苗,亚单位苗或成分苗,合成肽苗,基因工程菌苗,3、核酸菌苗4、寄生虫疫苗5、治疗性疫苗 2抗体类:1多克隆抗体2单克隆抗体3基因工程抗体4抗体诊断试剂或抗体诊断试剂盒 5抗体治疗药 3 人血液代用品:1血浆:预先加入抗凝剂采血离心后,弃掉有形成分,即为血浆血细胞2血浆白蛋白与γ-球蛋白3修饰血红蛋白 4 重组细胞因子:1干扰素2集落刺激因子(CSF)3白细胞介素( IL)4肿瘤坏死因子(TNF)5趋化因子6转化生长因子-β(TGF-β)7生长因子(GF) 5 反义寡核苷酸:1硫代反义寡核苷酸2、2‘-甲氧/乙氧基反义寡核苷酸3肽核酸(PNA)4其他 6 重组激素类:1多肽蛋白类激素2类固醇激素3氨基酸类激素4脂肪酸的衍生物类激素 单(多)克隆抗体 多克隆抗体:由具有多种抗原决定簇的病原微生物或抗原,刺激人或动物机体后,由B淋巴细胞产生的多种抗体的混合物,分泌在血清中。 单克隆抗体:1975年Kohler和Milstein首创,将在体外无限繁殖鼠骨髓瘤细胞与针对单一抗体的脾脏B淋巴细胞融合后,筛选出来的特定融合子细胞系,经进一步培养和发酵后,即可获得针对某一抗原决定簇的便于大规模生产的单克隆抗体。 人类基因组(后基因组)计划 人类基因组计划(HGP)1990-2000年6月,完全解密人类23对染色体的核苷酸序列,人类基因组约由30亿对碱基排列组成,其中人类生存所必须的遗传信息和基因单位总数约为3-5万个。 一些与遗传病有关的重要基因已被分离和测序,另一些常见病(乳腺癌,结肠癌,高血压,糖尿病和老年痴呆症)的涉及遗传倾向的基因已在染色体的遗传图谱上精确定位。随着大量与人类健康有关的基因的定位,鉴定和分离,遗传诊断,遗传修饰和基因治疗都将实现。 后基因组计划(HPGP):研究基因组功能,大约3-5万个基因的转录,转译表达功能的系统工程。 基因治疗 将外源基因或核酸导入人体,实施防治疾病的一种新技术和新治疗方法,能从根本上治愈一些现有的常规疗法不能解决的疾病。 目的:恢复异常表达或缺失的体细胞基因的功能(免疫,抑制等),引入有治疗价值的其他来源的基因(前药转换,去除耐药基因等)。治疗癌症,单基因疾病,心血管病,传染性疾病,基因标记和其他疾病治疗。 原核细胞培养 真核细胞培养 动物细胞培养 植物细胞培养 常用动物细胞细胞系 叙利亚仓鼠肾细胞系(BHK-21) 中国仓鼠卵巢细胞系(CHO-K1) 人二倍体细胞系(MRC-5)? 猴肾细胞系(VERO) 犬肾细胞系(MDCK)? 昆虫细胞系(Sf-9,21) 贴壁细胞培养及微载体 动物细胞贴壁培养反应器:细贴附在中空纤维管外壁生长,可很方便地获取营养物质和溶氧。 转瓶 中空纤维培养装置: 细胞密度109个/ml 动物细胞微载体培养反应器:细胞附着和生长在悬浮于培养液中的微珠(微载体)表面,借助于温和搅拌,使细胞均匀分布的一种培养方法。这种培养方法将单层培养和悬浮培养结合起来,具有放大容易,细胞所处环境均一等优点。 动物细胞微载体培养反应器:细胞附着和生长在悬浮于培养液中的微珠(微载体)表面,借助于温和搅拌,使细胞均匀分布的一种培养方法。这种培养方法将单层培养和悬浮培养结合起来,具有放大容易,细胞所处环境均一等优点。 微载体 外观:表面平滑,使细胞容易扩散,有透明的光学外表,便于用显微镜观察细胞生长情况。珠径在40-120μm范围内,经盐水溶胀后,珠径增大到60-280μm,珠径大小均一。 理化性质:带适当电荷,使细胞容易贴壁生长。其密度略大于培养基的密度,1.03-1.05kg/L范围内,最大不超过1.1kg/L.具有较好的耐热性。由非刚性基质合成。微载体需不吸着培养基中的营养成分,特别是血清。表面必须是亲水性,使细胞容易贴壁,对细胞生长无毒性。 成本低,能反复使用 生物反应器原理及培养方式 一次性生物反应器 培养基配制 细胞决定培养基的选择 常用培养基:GMEM, EMEM, DMEM等. 常用添加物:缓冲液,EDTA,L-谷氨酰胺,抗生素,(青霉素,链霉素等),杀真菌剂(两性霉素B),(胎)牛血清。 一般

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