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人布鲁氏杆菌BrucellaELISA检测试剂盒.PDF
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存
于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人布鲁氏杆菌 (Brucella)ELISA检测试剂盒
自备物品
使用说明书
1. 酶标仪 (450nm)
检测原理
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验 (ELISA)。往预先
3. 37℃恒温箱
包被人布鲁氏杆菌 (Brucella)捕获抗体的包被微孔中,依次加入
操作注意事项
标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的
TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解
转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人布鲁氏杆菌
后再使用。
(Brucella)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度 (OD
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封 (低温干燥)保
值),判断样品是否含有人布鲁氏杆菌 (Brucella)。
存。
样品收集、处理及保存方法
3. 预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
地分离。
试剂盒组成
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 名称 96孔配置 48孔配置 备注
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 微孔酶标板 96孔 48孔 无
阴性对照 0.3mL 0.3mL 无
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟 阳性对照 0.3mL 0.3mL 无
样本稀释液 6mL 3mL 无
取上清。
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释 洗板方法
底物A 6mL 3mL
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