三例小麦细胞质雄性不育系线粒体DNA的扩增片段长度-微生物学报.PDFVIP

646 朱启迪 等/三例小麦细胞质雄性不育系线粒体DNA 的扩增片段长度多态性分析 生 物 工 程 学 报 Chinese Journal of Biotechnology May 25, 2013, 29(5): 646−656 /cjbcn ©2013 Chin J Biotech, All rights reserved 农业生物技术 三例小麦细胞质雄性不育系线粒体DNA 的扩增片段 长度多态性分析 * * 朱启迪 ，张新钵 ，Ejaz M ，张改生，车会学，王书平，宋齐鲁，杨书玲，张龙雨 西北农林科技大学农学院，陕西 杨凌 712100 朱启迪, 张新钵, Ejaz M, 等. 三例小麦细胞质雄性不育系线粒体 DNA 的扩增片段长度多态性分析. 生物工程学报, 2013, 29(5): 646−656. Zhu QD, Zhang XB, Ejaz M, et al. Analysis of three wheat cytoplasmic male sterile line smitochondrial DNA by AFLP. Chin J Biotech, 2013, 29(5): 646−656. 摘 要: 细胞质雄性不育是小麦杂种优势利用的重要途径，为了鉴定３例小麦雄性不育系的细胞质类型，对 其线粒体DNA (mtDNA) 进行扩增片段长度多态性 (Amplified fragment length polymorphism ，AFLP) 分析。文 中利用差速离心法和不连续蔗糖密度梯度超速离心法提取纯化小麦线粒体。结果表明：通过该提取方法获得的 mtDNA ，其质量和纯度能够满足PCR 反应和遗传学分析。在 64 对选扩引物中，筛选到了 4 对特异性引物， 其中引物E1/M7 在ms (Kots)-90-110 不育系扩增出3 条特异条带；引物E4/M2 在ms (Ven)-90-110 不育系扩增 出2 条特异条带；引物E7/M6 在ms (S)-90-110 不育系中扩增出2 条特异条带；引物E6/M4 在ms (Kots)-90-110 不育系中扩增出2 条特异条带。这些特异引物可以用来作为鉴定具有粘果山羊草Aegilops kotschyi 、偏凸山羊 草Ae. ventricosa 、斯卑尔脱小麦Triticum spelta 3 类不育细胞质型小麦雄性不育系的细胞质分子标记，为研究 小麦细胞质雄性不育机理奠定了分子基础。 关键词: 小麦，细胞质雄性不育，线粒体DNA ，扩增片段长度多态性，分子标记 Received: September 16, 2012; Accepted: December 26, 2012 Supported by: National High Technology Research and Development Program of China (863 Program) (No. 2011AA10A106), National Natural Science Foundation of China (Nos. , Research Fund for the Doctoral Program of Higher Education (No. 20090204110024), Key Scientific and Technological Innovation Special Projects of