人教版选修1 血红蛋白的提取和分离 第1课时学案.docVIP

专题五 血红蛋白的提取和分离 复习 1、含量：占细胞干重的50％以上，细胞中含量最多的有机物 2、组成元素C、H、O、N、S 3、相对分子质量高分子化合物 4、基本组成单位：氨基酸氨基酸 5、结构简式： 6、种类：8种必需12种非必需氨基酸 7、氨基酸连接方式脱水缩合　 9、分子结构 8、肽键 10、蛋白质多样性的原因：氨基酸的种类、数目、排列顺序变化多端；多肽链和蛋白质的空间结构千差万别 11、蛋白质的鉴定方法 ①试剂 ②步骤 ③现象 12、生理功能 是一切生命活动的主要承担者，结构蛋白和功能蛋白 基础知识 一．凝胶色谱法 1、概念：凝胶色谱法也称做 ，是根据 分离蛋白质的有效方法。 2、原理：根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。 3、凝胶 ①性质：一些微小的多孔球体，内含许多 的通道，它只准许 的蛋白质进入。 ②化学本质：多糖类化合物---葡聚糖或琼脂糖。 4、具体过程：当不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质 进入凝胶内部的通道，路程 ，移动速度 ；而相对分子质量 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在 移动，路程 ，移动速度 。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。 具体过程： 说明： A． 的蛋白质由于 作用进入凝胶颗粒内部而被滞留； 的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面，在颗粒之间迅速通过。 （1）、 混合物上柱； B． （2）、洗脱开始， 的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内； 的 蛋白质被排阻于凝胶颗粒之外； （3）、 的蛋白质被滞留； 的蛋白质向下移动。 （4）、 不同的蛋白质分子完全分开； （5）、 的蛋白质行程较短，已从 中洗脱出来， 的 蛋白质还在行进中。 二、缓冲溶液 1、定义：在一定范围内，缓冲液能够抵制外界的 和 对溶液 的影响，维持 基本不变。 2、作用：能够抵制外界的酸或碱的对溶液的PH值的影响，维持PH 。 3、配制：通常由 种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同PH范围内使 用的缓冲液。 4、缓冲剂：人体血浆的为H2CO3/NaHCO3 NaH2PO4 /Na2HPO4 5、实验必须使用缓冲溶液的原因：维持反应体系的pH不变。 三、电泳 1、概念：指 在电场的作用下发生 的过程。 （1）.许多重要的生物大分子，如 、 等都具有 ，在一定的 下，这些基团会带上 或 。 2、原理 （2）.在电场的作用下，这些带电分子会向着与其 的电极移动。 （3）.电泳利用了待分离样品中各种分子 以及分子本身的 、 的不 同，使带电分子产生不同的 ，从而实现样品中各种分子的分离。 3、电泳的类型：常用的电泳方法是 和 等2种，在测定蛋白质分子量时通常使用 。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于 以及 等因