栗羽、白羽和黄羽三种羽色鹌鹑红细胞和血浆酯酶的遗传多态性研究.pdfVIP

No．1 AIIjm丑1 Bulletin (October2006)V01．10 Biotechnology 栗羽、白羽和黄羽三种羽色鹌鹑红细胞和血浆酯酶的遗传多态性‘ 庞有志，赵淑娟，杨又兵，牛精凯 (河南科技大学动物科技学院，河南洛阳，471003) 摘要：利用垂直板聚丙稀酰胺凝胶电泳法对蛋用朝鲜龙城系(栗羽)鹌鹑及其突变系 白羽和黄羽的红细胞和血浆酯酶的遗传多态性进行了研究。结果表明红细胞酯酶Es—I， Es—III和血浆酯酶Es-3，Es-4均存在遗传多态性，其中红细胞酯酶Es—I和Bs一Ⅲ以及血 浆酯酶Es一3各出现3种表型A、AB和B，分别受常染色体上的一对等位基因A和B控制。 血浆酯酶Es一4出现2种表型即有带型和无带型，受显性基因Es一41和隐性基因Es一4‘控制。 经独立性r检验，三群体在红细胞酯酶Es-I，血浆酯酶Es-3和Bg一4的基因分布差异不 显著(PO．05)，在红细胞酯酶Bs一Ⅲ位点，白羽和栗羽，黄羽和栗羽间的基因分布差异极 显著(PO．01)，黄羽和白羽间的基因分布差异不显著(PO．05)．经适合性x。检验，三群 细胞酯酶Es一Ⅲ和血浆酯酶Es一3两个位点除栗羽鹌鹑外，黄羽和白羽均处于遗传平衡状态。 本研究揭示的红细胞酯酶Es-IIi和血浆酯酶Es-3的电泳图谱较以往报道的酶谱带数多． 关键词：鹤鹑，红细胞酯酶；血浆酯酶；遗传多态性 朝鲜龙城系鹌鹑是我国蛋用鹌鹑生产的当家品种，其羽毛为栗色，白羽和黄羽分别是朝鲜龙城 系(栗羽)的突变系。研究证实“1，栗羽、白羽和黄羽是由位于z染色体上两个具有连锁关系的基 因座Y／y和8／b相互作用的结果，Y基因决定栗色，Y基因决定黄色，栗色对黄色为显性；B基因决 定有色，b为白化，有色对白化为显性。龙城系鹌鹑在这两个基因座为完全的显性纯合，而白羽和 黄羽是朝鲜龙城系鹌鹁分别在B／b基因座和Y／Y基因座发生隐性突变的结果，利用性连锁遗传原理 将这三种羽色鹌鹑通过多种方式可组成自别雌雄配套系，在生产上具有极大的推广价值”1。有关这 三种羽色鹌鹑的生长发育和生产性能我们已进行了比较研究。一，但其遗传学差异还没有详细的研 究。酯酶(Esterase，Es)是一类水解羧酸酯键的酶类，广泛存在于动物的血液和脏器，而且具有 丰富的多态性。研究动物酯酶多态现象对探讨家畜起源、研究品种间关系和品种标记等方面都具有 重要的意义。鹌鹑红细胞中存在有酯酶Es—I和Es一Ⅲ，血浆中存在有酯酶Es一3和Es一4，目前这四 种酯酶的遗传机制已阐明清楚，并且在鹌鹑群体中存在着广泛的多态性。1，本研究利用聚丙稀酰胺 凝胶电泳技术对栗羽、白羽和黄羽三种羽色鹌鹁的红细胞和血浆酯酶的多态性进行了分析，旨在为 三种羽色鹌鹑的品系选育和杂交利用提供参考。 1．材料与方法 1．1血样采案和制备 137只健康成年产蛋鹌鹁(其中黄羽和白羽各45只，栗羽47只)购自河南省武陟县小徐岗村 的生理盐水(o．85％Nacl)洗涤2次，最后用2倍体积的蒸馏水溶解红细胞，血浆和红细胞溶解液放 置．20℃冰箱保存备用。 1．2主要仪器和试荆 ’基金项目t河南省科技攻关项目。蛋用鹌鹑自别雌雄配套系的培育及配套技术研究”(961040104)部分内容。 作者简介：庞有志(1963一)，男，河南新蔡人，教授，博士，主要从事动物遗传育种的教学和研究工作。 第十次全国畜禽遗传标记研讨会论文集 型，北京塞多利斯仪器公司)等。所用试剂主要有丙稀酰胺(sigma公司)、甲叉双丙稀酰胺(Fluka 公司)、三羟基甲烷氨基甲烷，o一乙酸萘酯、B一乙酸萘酯，坚牢蓝RR等。 1．3分析方法 1．3．1电泳 采用不连续聚丙稀酰胺凝胶电泳测定红细胞酯酶和血浆酯酶，按张龙翔等…方法配制凝胶和缓 冲液，本试验采用PH8．9的不连续电泳缓冲系统，浓缩胶浓度4％，分离胶浓度8％，在4C条件下电 泳，采用稳流电泳．起女fi电流8mh，进入分离胶后电流调至20rd～，分离红细胞酯酶Es—III和血浆酯 度为2．6％。 1．3．2显色及分型 Tris／HCl 按吴鹤龄…介绍的方法显色，1％a、B醋酸萘酯3ml，坚牢蓝RR盐lOOmg，0．5mof