HPLC高速色谱柱法及近红外光谱法在抗生素快速检验中的应用探讨研究.pdfVIP

摘 要 为了保障人民用药的安全有效，各级药品检验所每年都要承担全国范围内大量药 品的监督检验任务。目前，各药检所多为仪器资源不足，不能完全满足药品监督检验的 需要;传统的药物快速检验方法以定性为目的，无法满足定量分析的需求，因此提高现 有仪器资源的效率，开发同时完成定性及定量分析的快速检验方法具有重耍意义。 HPLC法是药物分析中常用的定性与定量方法，其实现快速分析通常有2种途径 : 采用微柱或短粗尺寸色谱柱。微柱不能用于普通HPLC系统，难以推广，而短粗尺寸色 谱柱可适用于仪器资源有限的实验室。本文探讨了以药物在常规色谱柱上的HPLC分析 方法为基础，如何应用AlltechC,8高速色谱柱建立HPLC快速分析方法。 首先，以罗红霉素及其相关物质为例，比较其在Alltech高速色谱柱与相同填料常 规色谱柱上的色谱行为，考察二者的差别与共性及高速色谱柱流速、分离度与保留值的 特点，并建立了快速HPLC分析方法。 其次，考虑到溶质在不同填料C,:色谱柱的保留行为可能不同，本文以罗红霉素及 其相关物质为例，探讨了三种不同填料C,:常规色谱柱与AlltechC,8高速色谱柱上溶质保 留值与分离度的相关性，并用其他药物进行了预测验证。同样，对C8高速色谱柱与常规 色谱柱进行了比较研究。在上述实验的基础上，讨论了Alltech高速色谱柱的应用方法及 适用范围。 同时，随着液相色谱系统的高精度微机化，梯度洗脱已广泛地应用于药物分析，成 为等度洗脱很好的补充。但对于填料性质或规格不同的色谱柱，如梯度程序不变，溶质 的色谱行为会有较大差异。为了使用高速色谱柱完成快速检验，本文以梯度洗脱方法分 析利奈哇胺及其杂质为例，结合梯度洗脱原理，探讨用填料性质不同的C,:色谱柱间或填 料相同规格不同的C,:色谱柱进行分离测定时，梯度程序的改变规律。 另外，由于仪器的发展及操作软件中光谱预处理方法的并入，近红外光谱法 (near-inrfaredspectroscopy,MRS)近年来日益受到重视。本文综述了近红外光谱技术及 其在固体药物定量分析方面的应用，首次用不同厂家的样品，以内部交叉验证方法检验、 优化模型，建立罗红霉素片含量校正模型，并对预测训练集外的样品完成定性定量检验， 初步探讨药品检验中应用NIR法进行快速分析的可能性。 关键词:快速分析，高速色谱柱，HPLC，保留值，分离度，NIR Abstract Everyyearagreatlotofdrugsareanalyzedintheinstitutesfordrugcontrol.Atpresent, theequipmentsoftheinstitutescannotadapttherequirement.Andthetraditionalmethodof drugsfasttest,whichpurposeisidentification,cannotbeusedforquantitativeassay.Soitis importantforustoenhancetheefficiencyoftheinstrumentandtostudythenewmethodsused forspecificallyfastqualitativeandquantitativedetermination. TheHPLCmethodisusuallyusedtoqualifyandquantifyinthepharmaceuticalanalysis. Infasttestmethods,micro-columnorhigh-speedcolumn canbeused.Micro-columncannot beusedinroutineHPLCequipmentsandcannotbewidelyused.ButtheHPLChigh-speed columnissuitabletobeappliedinthoselaboratorieswhereinstrumentisabsent.Inthispaper, wediscussedhowtobuiltHPLCfastmethodsbyAlltechCishigh-speedcolumnonthebasis ofmethodsbytheroutinecolumn. Firstly,onhigh-speedandroutinecolumnsthoseareonlydifferentin