原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
丝状真菌瑞氏木霉外源基因表达系统的构建.PDF
ISSN 中国生物化学与分子生物学报 2003 年 12 月
( )
CN 113870Q Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 19 6 :736～742
丝状真菌瑞氏木霉外源基因表达系统的构建
汪天虹 , 吴志红 , 刘世利 , 曲音波
( 山东大学微生物技术国家重点实验室,济南 250100)
( )
摘要 采用 PCR 技术体外扩增获得了瑞氏木霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶 Ⅰ CBH Ⅰ启动子和终
止子序列. 并以大肠杆菌质粒pUC19 为骨架 ,在该启动子和终止子序列间加入多克隆位点 ,构建了
瑞氏木霉强表达整合型载体 pTRIL. 以质粒pAN71 为模板 ,体外扩增了带有潮霉素磷酸转移酶
( hph) 基因的 DNA 片段 ,将 hph 插入pTRIL 的 cbh 1 启动子和终止子序列之间 ,构建了 P hphT
cbh1 cbh1
表达盒. 用此表达盒转化瑞氏木霉 C30 原生质体 ,在潮霉素平板上得到 15 株抗性转化子. 对其中的
H1 转化子进行了 PCR 和 Southern 印迹分析 ,证实 hph 基因确实整合到转化子染色体 DNA 上 ,并在
Pcbh1 启动子控制下进行高效表达. 转化子 H1 对潮霉素抗性达 150 mgL , 比出发菌株提高2 倍. 瑞氏
木霉强表达整合型载体pTRIL 的构建成功为开展瑞氏木霉分子生物学研究以及进一步的工程菌株
构建工作奠定了基础.
关键词 瑞氏木霉 , 外源基因表达系统 , cbh 1 启动子 ,构建与表达
中图分类号 Q812
Construction of Heterogeneous Genes Expression System of
Filamentous Fungus Trichoderma reesei
WANG Tianhong , WU Zhihong , LIU Shili , QU Yinbo
( State Key Laboratory of Microbial Technology , Shandong University , Jinan 250100 , China)
( )
Abst
文档评论（0）