不同基因型甘蔗愈伤组织诱导和增殖特性的研讨.pdf

摘 要 本研究采用愈伤组织诱导率和增殖率有差异的三个甘蔗基因型，测定了各基因 型叶片的净光合速率;外植体和脱分化阶段的第4,8,12天和继代阶段的第4,8, 12天的过氧化氢酶 (CAT)、多酚氧化酶 (PPO)、可溶性蛋白质含量、超氧化物歧化 酶 (SOD)活性:观察了脱分化阶段培养物的组织形态学及组织细胞学变化;测定了 愈伤组织诱导率和增殖率。比较了这些性状的差异;探讨了这些性状与愈伤组织诱导 率和增殖率的关系，以明确愈伤组织诱导率和增殖率的差异的原因，找出其规律性， 为不同基因型甘蔗组培工厂化繁殖提供理论基础及技术准备。 试验结果表明: l三个基因型愈伤组织的诱导率和增殖率都存在显著差异。RoCl既具有相对较 高的诱导率又具有相对较高的增殖率，基本无酚害;基因型YT63/237具有相对中等 的诱导率和相对较低的增殖率，属于重度酚害;基因型YT57/423具有相对较低的诱 导率和相对中等的增殖率，属于中度酚害。 2.在脱分化阶段，诱导率高的基因型RoCl愈伤组织呈淡黄色，颗粒状，松散， 不褐化:诱导率居中的基因型YT63/237愈伤组织呈现白色.粘稠，团状，水溃状， 未脱分化的外植体不多，且边缘呈黑揭色，愈伤组织褐化严重，有的已渗入培养基， 培养基整个变褐;诱导率最低的基因型YT57/423愈伤组织粘稠，枯黄色，外植体多 在边缘长愈伤组织 愈伤组织褐化较严重，米脱分化的外植体较多。 3 在继代阶段，增殖率最高的基因型RoCl继代愈伤组织增殖较好，新增殖愈 伤组织淡黄色，颗粒状，粘在一起;增殖率居中的基因型YT57/423继代愈伤组织黄 色，粘稠，团状，增殖较差，有一部分愈伤组织呈干瘪状，枯黄色:增殖率最低的基 因型YT631237继代愈伤组织粘稠，团状，水演状，褐化严重，有的已渗入培养基， 培养基整个变褐，褐化愈伤组织很难增殖。 4.不同基因型甘蔗之间叶片净光合速率及其外植体CAT活性、PPO活性、可 溶性蛋白质含量和SOD活性都存在显著差异。三个基因型净光合速率的变化趋势与 增殖率的变化趋势相同;三个基因型外植体CAT活性变化趋势与增殖率变化趋势一 致;三个基因型外植体可溶性蛋白质含量和PPO活性变化趋势与诱导率变化趋势一 致。 5.在组织培养的脱分化过程中，从培养的第4天到第12天期间，CAT,PPO 的活性变化均呈现上升的总趋势，可溶性蛋白质含量、SOD活性均呈现下降总趋势。 CAT活性、PPO活性、可溶性蛋白质含量和SOD活性在脱分化阶段第4,8和12天 基因型之间都存在显著差异。 在第4,8,12天三个基因型CAT的变化趋势和诱导率的变化趋势一致;在第4 天，三个基因型PPO活性的变化趋势和诱导率变化趋势一致;三个基因型可溶性蛋 白质含量在第4,8,12天的变化趋势和诱导率的变化趋势相同;在第4天，三个基 因型SOD活性的变化趋势与诱导率的变化趋势一致，在第12天，三个基因型SOD 活性变化趋势与增殖率的变化趋势相同。 6.在继代培养的过程中，不同基因型之间CAI，活性、PPO活性和SOD活性在 继代的第4,8和12天都存在显著差异，可溶性蛋白质含量在第4,12天存在显著差 异。 在第4,8,12天三个基因型CAT活性的变化趋势与增殖率的变化趋势一致;在 第4天和第8天，三个基因型PPO活性的变化趋势与增殖率的变化趋势相反，即PPO 活性越低的基因型，其增殖率就越高。在第 12天，三个基因型可溶性蛋白质含量的 变化趋势与增殖率的变化趋势一致。 7.基因型RoCl诱导率比YT57/423高，诱导愈伤组织的时间也比YT57/423短， 基因型RoCl培养的第7天，从组织切片上可以看到有愈伤组织长出，而YT57/423 培养的第11天才从组织切片上看到有愈伤组织长出。 8.在愈伤组织形成过程中的细胞学观察表明，脱分化的第5天，不同基因型培 养物组织结构和细胞超微结构均有差异，这种差异可作为不同基因型组培中的愈伤组 织诱导率高低鉴别的依据之一。 9.甘蔗基因型的植株叶片的净光合速率，外植体的CAT活性、PPO活性以及可 溶性蛋白质含量均可作为预测甘蔗诱导率和增殖率的参考依据。脱分化阶段第4,8, 12天的CAT活性和可溶性蛋白质含量，第4天的PPO活性和SOD活性，均可作为 诱导率的参考依据;脱分化阶段第12天的SOD活性及其愈伤组织继代阶段第4,8, 12天的CAT活性，继代阶段第4,