四型胶原和C-erbB2在口腔念珠菌白斑中的表达.PDFVIP

四型胶原和C-erbB2 在口腔念珠菌白斑中的表达 高岩，刘昕燕，韩志峰，王颖 北京大学口腔医学院口腔病理研究室 gaoyan0988@263.net 中文摘要：目的：研究32 例口腔念珠菌白斑四型胶原和癌基因蛋白C-erbB2 的 表达 特点。方法：SP 免疫组织化学染色。结果：四型胶原染色在27 例成功。 正常和 单纯增生口腔上皮基底膜区四型胶原呈均匀线状阳性，发生改变时表现 为增厚 、变薄和染色中断。上皮异常增生时变薄和染色中断者多于非上皮异常 增生者 。C-erbB2 在 78 ％的念珠菌白斑为阳性，主要在棘层细胞膜出现，呈网 状。上 皮异常增生与否与染色强度和阳性率无关。结论：念珠菌白斑四型胶原 表达重 要的改变是线状阳性变薄和染色中断，可能与癌前病变的基底膜降解有 关； C-erbB2 在念珠菌白斑中的表达较广泛，是一般性细胞增殖调节因子，与 上皮异常增生的关系不大。 关键词：C-erbB2 ；四型胶原；口腔念珠菌白斑 正文 基底膜是一种特殊的细胞外基质，其主要功能是将上皮和结缔组织分隔开 来。除此之外基底膜对于上皮细胞的附着、增殖、分化及细胞迁移也很重要。基 底膜的成分主要有层粘连蛋白，四型胶原、硫酸肝素糖蛋白等，其中四型胶 原 可能在肿瘤的浸润和转移中发生改变，口腔癌前病变中四型胶原所发生的改 变 对 口腔癌发生机理的理解有意义。 C-erbB2 是一种较常见的在某些恶性肿瘤中有异常表达的癌基因，其产物为 185KD 的跨膜蛋白，具有落氨酸激酶活性。作为一种与表皮生长因子受体基因 有 同源性的癌基因，C-erbB2 在正常情况下处于非激活状态，对细胞的生长分化 起 重 要调节作用，异常激活后具有肿瘤转化活性，在某些肿瘤有过高表达。 口腔念珠菌白斑具有细胞增殖活跃、上皮异常增生发生率高，P53 蛋白表达 增强等癌前病变特点，但该病变中有否四型胶原C-erbB2 的异常表达目前还不清 楚，本研究用免疫组织化学方法分析了口腔念珠菌白斑中四型胶原和C-erbB2 的 - 1 - 表达。 材料与方法 根据Cawson 和Binnie 对念珠菌白斑的临床及显微镜下表现的描述，结合我 室对念珠菌白斑的组织学观察，制定出对念珠菌白斑的诊断标准：临床表现为 白 色斑块，常为非均质性；组织学上为上皮增生，上皮增厚；上皮内白细胞游 出， 角化层或浅棘层见多形核白细胞形成的微小脓肿；PAS 染色见上皮内有白 色念 珠菌菌丝侵入。本研究符合上述标准者32 例，另选25 例普通白斑作为对照 。 上述病例的组织标本经常规方法制成5 微米石蜡切片。用SP 法进行免疫组 织化学染色。主要步骤为：切片水化，用 0.3%过氧化氢甲醇液封闭内源性过氧 化物酶20 分钟；对于四型胶原染色者，先将切片用0.1% 的胰蛋白酶消化1 小时， 然后将 切片置于微波炉中加热10 分钟；C-erbB2 染色只用微波加热法；依次滴 加四型胶原和C-erbB2 单克隆抗体(DAKO,1:75)、生物素化第二抗体(DAKO,1:500) 和酶联 链亲合素(DAKO,1:800)、用 DAB 显色。以上各步间均用缓冲液冲洗。 苏木素复染，光镜观察 。 阴性对照用缓冲液代替一抗，其余步骤相同。 结果评价：四型胶原染色主要观察基底膜阳性区的形态，有无增厚、间断 、 复层等现象； C-erbB2 染色主要观察阳性强度及其在上皮中的分布部位。 结果 一、四型胶原在念珠菌白斑中的表达。32 例染色成功27 例，四型胶原均为 阳性阴性对照未见染色。阳性区域分布在基底膜区和固有层血管基底膜，呈褐 色 线条状。在正常口腔上皮和上皮单纯性增生的念珠菌白斑，线条状阳性区连 续、 完整，宽度较一致(