实验一植物分生区细胞染色体制片与有丝分裂过程的观察.doc

目 录 实验室工作规程 1 实验一 植物分生区细胞染色体制片与有丝分裂过程的观察 4 实验二 核型分析 10 实验三 植物同源多倍体的人工诱发与鉴定 12 实验四 植物性状遗传率估算 17 实验五 性状杂种优势与显性程度估算 19 实验六 控制性状最少基因数目估算 21 实验七? 过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳 23 附 录 32 附录Ⅰ 常用试剂的配制 32 附录Ⅱ 常用染色液的配制 35 附录Ⅲ 常用缓冲液的配制 38 附录Ⅳ X2值表 39 实验室工作规程 为保证遗传学实验能正常进行并获得理想的实验结果，避免在实验中发生差错和意外事故，实验操作者必须严格遵守实验室规则，认真做好实验前后和实验过程中的各项工作。 一、基本规则 1．实验前必须预习，明确本次实验的目的、原理、内容和方法。实验时须保持安静，按实验教材和指导教师的要求进行操作，并详实记录实验中出现的情况和获得的实验结果，对资料进行整理分析，得出结论，写出实验报告。 2．实验室、工作台、各种仪器、用具、玻璃器皿等必须保持清洁整齐，工作台要严防酸、碱腐蚀。各种化学药品、试剂等必须贴上标签，分门别类，放置一定位置，便于取用。 3．正确使用显微镜及各种仪器，切勿使染料或试剂沾污镜头、镜台和所用仪器。如有沾污，须立即用镜头纸擦拭干净。 4．取用药品时，所用各类量具必须分开，严禁混用，用后须立即冲洗干净。称量固体药品时，必须在秤盘上铺垫清洁白纸或蜡光纸，调试平衡后再称，以防药品腐蚀秤具。称量纸要做到一称一换，以防药品混杂，导致所配试剂不纯。 5．遵守化学实验的操作要求，注意药品配制和使用时的安全。 6．实验完毕，须做好清洁整理工作，所用仪器、物品应放还原处。实验过程中如有损坏或丢失仪器用具，应如实填写报告单，视情况进行相应处理。 7．全班实验结束后，值日生安排整个实验室的全面清理打扫。离开实验室前，必须关闭所用仪器和灯具的电源，关紧水龙头和门窗。 二、显微镜的清洁和保养 显微镜是遗传学实验的重要仪器，使用时必须防尘、防高温、防湿、防药品侵蚀，在清洁保养中要做到以下几点： 1．取镜时必须一手提镜臂，一手托镜底，防止显微镜滑落损坏。 2．取出显微镜后，先用软毛刷、纱布拂擦镜身的防尘污物，用洗耳球吹去缝隙及镜头上的灰尘和纤维等物，再用镜头纸擦拭物镜和目镜，最后用细白丝绸把镜头再擦一次。 3．镜检时物镜只能由低倍镜到高倍镜，在高倍镜下只能用微调螺旋调焦，细心操作，以防压碎玻片，损坏镜头。 4．若发现镜头被药物或脏物污染，立即用擦镜纸醮少许二甲苯（以刚湿润纸为度）擦掉污物，再用擦镜纸擦干。 5．用完显微镜后进行清洁整理，将载物台放至最低处，转动物镜使之不要对着聚光镜，将显微镜放回原处。 6．严禁将显微镜与化学药品混藏。 三、玻璃器皿的清洁 实验室所用玻璃器皿的清洁与否直接影响实验结果，实验前必须对玻璃器皿彻底清洗。 （一）初用玻璃器皿的清洗 1．新购置的玻璃器皿表面常附有游离的碱性物质，可先用肥皂水或去污粉洗刷，再用清水冲洗干净，然后用1％～2％的盐酸浸泡4h以上，再用清水冲洗后用蒸馏水冲洗2～3次，100℃～130℃烘干备用。 2．新载玻片和盖玻片分别在盐酸乙醇[70％～95％工业乙醇（C2H5OH）100ml加浓盐酸（HCl）2ml]中浸泡4h，流水冲净，蒸馏水荡涤、晾干，置95％乙醇中加盖，以便随时取用。 （二）使用过的玻璃器皿的清洗 1．使用过的器皿应在未干前洗涤，如不能及时清洗，应浸在凉水中。洗涤方法：放入洗衣粉水中煮沸半小时，刷洗，清水冲净，蒸馏水荡涤，晾干或烘干；或在洗涤液中浸泡半小时，清水冲洗，蒸馏水荡涤，晾干或烘干。 2．对移液管、滴定管、量筒、量器等，使用后应立即浸泡于凉水中，避免残留的溶液干涸，难以清洗。工作完毕后用流水冲洗，除去附着的试剂、蛋白质等物质，晾干后浸泡在铬酸洗液中4～6h或过夜，再用清水充分冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～4次，风干后备用。 注：铬酸洗液配制方法 重铬酸钾（K2Cr2O7） 20g，浓硫酸（H2SO4，工业用，比重1.84）或废硫酸100ml，清水100ml。先将重铬酸钾溶于温水，冷却后徐徐加入浓硫酸，避免发热。此液呈红色，加盖防氧化变质，反复使用至变蓝黑色为止。器皿玻片洗净后再用此液浸泡，可延长其使用时间。 3．陈旧或用过的永久制片的玻片，可先在肥皂水中煮沸5～10min，或将玻片微热后浸入二甲苯中脱胶，洗去残留的树胶和浆糊，并用清水冲洗干净。然后放入洗液中浸泡30min，再用清水冲洗掉残留的洗液，最后用蒸馏水洗净，置95％乙醇中保存备用。 四、玻璃器皿的干燥和灭菌 遗传学实验中以微生物为实验材料时，实验所用的玻璃器皿必须干燥和高温灭菌，防止杂菌污染。 （一）干燥 干燥的方法有自然晾干和烘干两种。自然晾干所需时