第四章分DNA长度多态性2.ppt

PCR技术及在法医物证中的应用  ;概念：是一种体外快速扩增特异DNA片段的技术。 过程：利用人工合成的一对寡核苷酸引物，分别与待扩增DNA片段的两翼序列互补，在DNA聚合酶催化下，以靶DNA序列为模板，以四种dNTP为原料，经高温变性、低温退火、中温延伸“三步曲”的循环，使靶DNA片段经过约30个循环周期后达到百万倍的扩增。 ;DNA复制原理;DNA双链; PCR的反应过程;靶序列;③延伸;靶序列;靶序列;（二）、PCR的反应过程;PCR整个过程;循环次数; PCR反应体系;模板; 耐热DNA聚合酶在PCR反应中起着关键的作用。是从一种嗜热细菌分离出来的DNA聚合酶。酶活性在100 0C条件下，能保持几个小时。而其最适温度在72 0C左右（决定了PCR延伸温度）。 ; PCR扩增的前提是：根据已知基因座(或DNA片段)双链的序列，设计一对引物。; ;;理想的PCR反应;电泳;不同琼脂糖凝胶浓度与分离DNA大小范围的关系;聚丙烯酰胺凝胶浓度与分离DNA大小范围的关系;原理：DNA分子和银离子形成稳定的复合物，然后还原剂甲醛还原银颗粒，可以把DNA条带染成黑褐色。主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳，比溴乙锭灵敏200倍。; PCR产物 的聚丙烯酰胺凝胶电泳; 1 灵敏度高 是用于微量检材 2