2.菌种选育(下)PPT.ppt

;（一） 噬菌体的分布 广泛存在于土壤、肥料、粪便和污水中。有寄主细胞的地方，易找到其噬菌体。 病人外科疮口脓液：金黄色葡萄球菌噬菌体； 受细菌病害植株 细菌发酵工厂污水和土壤（情况严重时，甚至从空气中亦能分离到噬菌体）。 ;（1）抗噬菌体菌株选育方法 a 自然突变 以噬菌体为筛子，敏感菌株孢子自然突变为抗性菌株（抗性突变频率低）。 ; b 诱发突变 诱变处理过的敏感菌株孢子液分离在高浓度噬菌体平板上，长出的菌落为抗性变异株；生长速度一般与正常菌落相近。 诱变后敏感菌孢子接入种子培养基，菌丝长浓后加入高浓度噬菌体再培养几天，加入噬菌体反复感染，敏感菌裂解，平板分离抗性株。;（2）抗噬菌体菌株的特性试验 a 抗噬菌体性状稳定性试验 抗性菌株分别在孢子培养、种子培养和发酵培养过程中用点滴法或双层琼脂法测定噬菌斑。如都不出现噬菌斑，说明该菌株对此噬菌体具有抗性。 还可观察抗性菌株经多次传代后对 噬菌体的抗性是否稳定。;（三） 噬菌体的防治 感染噬菌体后的表观现象： 畸形菌丝，菌体迅速消失，pH值上升，发酵产物停止积累，甚至下降等现象。 链霉素、红霉素、万古霉素、金霉素、林可霉素、谷氨酸、丙酮丁醇、山梨糖、碱性蛋白酶发酵过程中都会遭到噬菌体侵染。 ;（1）正确判断 根据发酵中出现的异常现象。 （2）普及有关噬菌体知识 （3）选育抗噬菌体菌株 ;（4）消灭噬菌体 在感染噬菌体的发酵罐排气口及下水道喷洒药剂，防止噬菌体扩散。车间内外定期喷洒药物。常用药物有漂白粉、甲醛、石灰水等。 种子室尽量与外界减少接触，严格执行无菌操作，检查空气中有无噬菌体存在。 在噬菌体感染期间，车间内定时检查噬菌体分布情况，采取有效措施直至消灭为止。;（5）收集和保存噬菌体 将生产上出现噬菌体收集保藏起来用作选育抗性菌株及研究防治措施的材料和依据。 噬菌体以预防为主，筛选抗性菌株，保持环境卫生，杜绝噬菌体滋生。; ;概念： 将两个基因型不同的菌株接合使遗传物质重新组合，从中分离和筛选具有新性状的菌株。 ;杂交育种目的： ① 不同菌株的遗传物质进行交换和重组，获得杂种菌株； ② 不同菌株的优良性能集中于重组体中，克服长期用诱变剂处理造成的菌株生活能力下降等缺陷； ③ 通过杂交扩大变异范围，改变产品质量和产量，甚至出现新品种； ④ 分析杂交结果，总结遗传物质转移和传递规律，促进遗传学理论的发展。; 互补的两种营养缺陷型菌株的混合培养中将会有不再需要两种物质的重组子出现。 据此，1946年第一次在大肠杆菌中发现杂交行为。 ; 实验证明，把上述两种菌株分别接种到一个特制的U形管的两端培养，中间放一片烧结玻璃，培养液可流通但把细菌隔开，MM上不会出现菌落，说明细胞接触是基因重组的必要条件。 细菌可通过F因子转移、转化和转导等发生基因重组（杂交）。; 放线菌杂交是在细菌杂交基础上发展起来的。 基因重组过程近似细菌，育种方法有许多与霉菌相似。 ; 放线菌只有一条环状染色体，基因重组过程类似于大肠杆菌，大体上有以下四种遗传体系。; 混合培养营养缺陷型，菌丝间接触、融合形成异核体。 异核体： 在同一个细胞质里，存在两种遗传上不同的细胞核，在营养上互补。 菌落表型是原养型。基因型分别与亲本之一相同，无重组体出现。没有发生遗传信息交换。 ; 接合：异核细胞内不同基因型的细胞核在双方增殖过程中，发生部分染色体转移或遗传信息交换。 接合导致部分合子形成。 ;部分合子： 是由一个供体染色体片段与一个受体染色体的整体相结合而形成的，但亦可能两个亲本都不完整; 部分合子形成后，经过一次单交换，产生的杂合的染色体组，即：异核系。 它有一个二体区，即染色体的末端具有串联的重复结构。根据交换数目和染色体间的关系而产生单倍重组体或重组异核体。 异核系的菌落很小，遗传类型各不相同。能在MM或SM上生长。但异核系的分生孢子影印到同样培养基上就不能生长。;