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产异丁醇关键基因在大肠杆菌中表达的研究
微生物学通报 JUL 20, 2012, 39(7): 912−920
Microbiology China © 2012 by Institute of Microbiology, CAS
tongbao@
研究报告
产异丁醇关键基因在大肠杆菌中表达的研究
1 1* 2 1 1 1
潘超强 高强 郑春阳 孟庆艳 段强 冯少龙
(1. 天津科技大学 生物工程学院 工业发酵微生物教育部重点实验室 工业酶国家
工程实验室 天津 300457)
(2. 天津强微特生物科技有限公司 天津 300384)
摘 要: 【目的】改造大肠杆菌缬氨酸合成途径, 使其能够代谢合成异丁醇。【方法】将
乳酸乳球菌(Lactococcus lactis) 1.2829 的 2- 酮异戊酸脱羧酶基因(kivD)和醇脱氢酶基因
(adhA) 串联克隆到大肠杆菌 DH5α 宿主中表达。【结果】经过改造的宿主菌发酵24 h 后
异丁醇产量为0.12 g/L 。酶活测定实验发现, kivD 和adhA 基因在宿主菌中均得到表达, 但
由于KivD 的低表达量导致宿主菌最终的异丁醇合成能力偏低。通过研究温度和pH 对KivD
和AdhA 酶活的影响, 最终选定二者的最适温度为30 °C, 最适pH 为6.5 。【结论】通过
向宿主菌导入外源异丁醇合成基因能够改造其自身代谢途径, 从而合成异丁醇。
关键词: 2- 酮异戊酸脱羧酶, 醇脱氢酶, 大肠杆菌DH5α, 异丁醇
Coexpression of two essential isobutanol synthesis genes in
Escherichia coli
PAN Chao-Qiang1 GAO Qiang1* ZHENG Chun-Yang2 MENG Qing-Yan1
DUAN Qiang1 FENG Shao-Long1
(1. Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology, Ministry of Education, College of
Biotechnology , Tianjin University of Science Technology, National Engineering
Laboratory for Industry Enzymes , Tianjin 300457, China)
(2. Robustnique Corporation Ltd ., Tianjin 300384, China)
Abstract: [Objective] E. coli DH5α modified the valine biosynthesis pathway to biosynthesize
基金项目：国家 973 计划项目(No. 2011CB707401); 国家 863 计划项目(No. 2012AA021302); 天津市滨海新区自主
创新重大项目(No. 2011-BK120014)
*通讯作者：Tel: 86-22 : gaoqiang@
收稿日期：2011-10-27; 接受日期：2011-12-30
潘超强等 : 产异丁醇
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