5-电泳及其应用精选.ppt

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5-电泳及其应用精选

四、电泳及其应用 (一)、电泳 (二)、电泳测量的理论公式 (三)、电泳及其应用 电泳:带电的胶粒或大分子在外加电场中,向带相反电荷的电极作定向移动的现象。 1、电泳测量的理论公式 Smoluchowski认为,在电场中带电粒子运动是静电力和阻力的综合结果。当粒子半径α远大于带电粒子表面扩散双电子层厚度κ-1时(即κα为粒子半径与双电子层厚度之比),粒子表面可视为平面。此时粒子在外电场作用下的线速度μ为: 式中,E为外加电场强度;ε为介质的相对介电常数;ε0=8.85×10-12 F·m-1;η为介质粘度;ζ为电动电势。 Henry等认为,对电泳速度有影响的作用力除了静电力和介质阻力外还有其他作用的贡献。主要有: 1、延迟效应:在外电场作用下,靠近粒子表面的反离子向着与粒子运动方向相反的方向运动,从而可减小粒子的电泳速度。 2、在外电场作用下,粒子原有双电子层结构发生变动,粒子被极化,使其有偶极子的性质。极化电荷产生的电场对粒子表面电荷产生作用,从而影响电泳速度。 电泳速度:单位时间内带电粒子在电场中移动的距离(cm/s)。 考虑到上述因素和粒子大小对电泳速度的影响,Henry得出: 若已知电解质浓度、粒子大小和形状可计算出参数κα和电泳速度。 单位电场强度时粒子运动的线速度称为电泳淌度、电泳迁移率或电泳速率。即 电泳淌度μ的单位为 m·s-1/(V·m-1)或m2·V-1·s-1 。 二、电泳研究的应用 电泳最重要的应用时能较方便的测出ζ电势。电泳应用的实例: (1)、利用原电池原理制成的电泳探针来确定胶体粒子表面带点符号,将直径约几毫米的铜片和锌片作为电极与焊在玻璃管中铂丝连接,两玻璃管中的铂丝构成通路,Cu为负极,Zn为正极,带电胶体粒子向带点符号相反的电极移动,并在电极表面电性中和而聚沉,形成带色沉积物,这样便可判断胶体粒子带电符号。 简易电泳探针 (2)ζ电势的测定 1、宏观界面移动电泳 2、显微电泳 (3)电泳沉积: 电泳沉积是利用带电粒子在外电场作用下在与粒子带点符号相反的物体表面形成牢固包覆层的技术。主要靠悬浮粒子的带电。粒子的迁移速度和在被包覆物体表面形成的包覆层质量与外加电场强度有关。 利用这种方法可以在金属表面形成涂料、橡胶、塑料凳物质的涂层,可以提高金属的防锈能力,表面绝缘性能等。 电动的其他应用: ·污水处理 ·环境治理 ·生化电泳技术 醋酸纤维素薄膜电泳 ① 电泳后区带界限清晰。 ② 通电时间较短(二十分钟至一小时)。 ③ 它对各种蛋白质(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都几乎完全不吸附,因此无拖尾现象。 ④ 对染料也没有吸附,因此不结合的染料能完全洗掉,无样品处几乎完全无色。 醋酸纤维素薄膜电泳 电泳技术的几个特点 电泳技术具有设备简单、操作容易、快速、准确、易重复等特点。 既能用作物质的定性分析及定量分析,也能作为一种制备技术。 与层析和超离心一起,被称为三大分离分析技术。 谢谢观赏 * * * *

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