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Cell 子刊：“脆弱”的足细胞终于活了下来， 新发现的两种“老药”让肾病治疗有了新希 望 原创2017-12-18 订阅号APExBIO 研究意义 足细胞（podocyte）是肾脏过滤器的终末分化细胞，足细胞的缺失会导致肾脏疾病 进展和肾衰竭。进展性肾脏疾病威胁全球数亿人的健康，然而，迄今为止，没有促 进足细胞存活的疗法。近日，来自美国哈佛大学医学院附属麻省总医院 （Massachusetts General Hospital and Harvard Medical School）的Sieber 等 人进行了千余种 “老药”的高通量筛选实验，发现了两种促进足细胞存活的化合物 ——BRAFV600E 抑制剂GDC-0879 和腺苷酸环化酶激动剂Forskolin。GDC-0879 通过恢 复MAPK 信号传导来保护足细胞；Forskolin 通过减弱慢性应激蛋白的生物合成促进 足细胞存活，两者保护足细胞在面对各种死亡诱导物时存活下来。这项工作揭示了 临床迫切需要的足细胞保护疗法的新治疗靶点， GDC-0879 样分子可能成为治疗进 展性肾病的优选者，对于肾病药物的挖掘具有重要意义。研究结果发表于Cell 子刊 《Cell Chemical Biology》。 图1 GDC-0879 激活 MAPK 信号保护足细胞 什么是足细胞？足细胞（podocyte），即肾小囊脏层上皮细胞，它附着于肾小球 基底膜的外侧，连同血管内皮细胞和肾小球基膜一起构成了肾小球血液滤过屏障。 图2 足细胞是肾小球过滤器的关键组分 足细胞具有特殊的解剖位置，使其体内研究较为困难；又由于正常成年机体的肾 脏足细胞是一种终末分化细胞，体外培养的原代细胞不能增殖，因而足细胞一直 是肾脏病的难点和重点课题。通常的观点是肾小球没有对应的前体细胞来分化成 足细胞，所以一旦足细胞出现损伤或损失，就很难再修复，导致患者肾衰竭（kidney failure），只有肾移植才能治疗。因此，专门针对足细胞存活的治疗存在巨大的 临床需求。 足细胞是肾脏中唯一的有丝分裂后细胞，其独特的作用和活性需要高度动态的内 质网（ER）。有人在不同肾脏疾病的肾活检中发现足细胞中有ER 应激标记。也有 研究显示显示毒胡萝卜素（thapsigargin）和棕榈酸（palmitic acid）诱导的 ER 应激会导致足细胞死亡。 在这里，该团队利用1649 个临床应用和临床前分子组成的生物活性化合物库进行 高通量筛选（HTS）。使用毒胡萝卜素，来评测小分子化合物对足细胞存活的作用， 细胞活力通过检测ATP 水平进行评估。结果发现GDC-0879 和Forskolin 保护足 细胞存活的能力最强。 图3 高通量筛选出GDC-0879 和Forskolin V600E GDC-0879 通常靶向黑素瘤中的特定BRAF 突变（BRAF ）。在足细胞中，GDC-0879 反向影响内源性野生型BRAF 的热稳定性，表明GDC-0879 结合BRAF。除了BRAF 之外，GDC-0879还可以影响足细胞中BRAF-ARAF 下游的信号传导（但不影响CRAF）。 毒胡萝卜素诱导了ERK 活性的显著降低[p44 / 42 （ERK1 / 2）磷酸化减少]和MEK 活性的降低[MEK1/2磷酸化减少] 。而GDC-0879逆转了毒胡萝卜素介导的p42 / 44 磷酸化和MEK1 / 2 磷酸化减少。表明GDC-0879 通过结合足细胞中的BRAF 以启 动MEK / ERK 信号传导，从而保护足细胞免受细胞死亡诱导物的影响。然而促凋 亡ER 应激标志物CHOP 的水平保持不变，表明尽管有GDC-0879 保护足细胞，但是 ER 应激仍然持续在足细胞中。 图4 上，GDC-0879 恢复MAPK 信号；下，Forskolin 阻断蛋白生物合成 接下来，该团队将注意力转移到forskolin 上。与GDC-0879 相反，forskolin 不 影响毒胡萝卜素介导的MAPK 信号传导。forskolin 被证明以cAMP 依赖的方式保 护足细胞，这与最近的体内数据显示forskolin 保护小鼠免受严重的肾损伤是一 致的。Forskolin 的作用独立于