第四章 安全试验课件.pptVIP

第四章  安全试验 一、安全试验及其分类 1、安全试验 为评定某受试物的安全性而进行的各种毒性试验称安全试验。 每种新药或其他新的化学药品在正式推广应用前都应有安全试验的报告。报告一般分为两大部分：第一部分叙述用以评定受试物安全性的毒性试验的种类；第二部分详细叙述各种毒性试验。 2、安全试验分类： 主要分为两类： 第一类为一般毒性试验，包括急性、蓄积毒性、慢性毒性试验； 第二类为专门毒性试验，例如繁殖试验、致畸试验、致癌试验、致突变试验、局部刺激试验、迟发性神经毒性试验、溶血试验和行为试验等。 二、安全试验设计 （一）试验动物 可采用2～3种动物同时进行，其中一种为非啮齿类动物如狗、猴等。小鼠、大鼠和狗为最常用的试验动物，此外还应用兔和豚鼠等。大动物的应用受到一定的限制，主要是由于其体重和体积较大，因而厩舍占用面积较大，以及在作长时间毒性试验时受试物的应用量较多等。 试验设计时，根据受试物的性质选择不同种类的动物。例如研究化学毒物对实质脏器的损害作用时，可选用小鼠、家兔等；研究催吐反应，一般应用猫或狗，研究对眼的刺激作用，可选用家兔；研究对皮肤的刺激作用，常选用白色豚鼠或兔；致癌试验常用小鼠和大鼠；水污染物的毒性试验可用鱼、贝、水蚤和藻类等。 2．年龄 一般选用成年动物。试验动物的年龄一般按体重来计算。如成年小鼠的体重约为12～24g，急性试验选择小鼠的体重范围为18～24g，慢性试验时间较长，选择试验小鼠的体重范围为15～18g。 3．性别 一般试验选用雌雄动物各半，因为不同性别的动物常常对受试物的敏感性有差异。 4．健康和营养状况 应选择健康和营养状况良好的试验动物。营养状况不良的动物往往对毒物较敏感。 5．饲养管理 试验前应驯养试验动物1～2周，驯养过程中每天的自然死亡率不得超过10%，用作慢性试验的动物应在试验条件下驯养。 （二）试验分组 1．分组 根据试验目的和任务确定分组。动物分组应按随机分配的原则，使每个动物都有同等机会被分配到各个试验组中去，而不附加任何选择的条件。 在毒性试验中，除试验组外，还需设立对照组，对照的方法一般有两种： （1）组间对照（平行对照）：常用的有正对照和负对照。 （2）自身对照：对照和处理（如给予毒物）试验都在同一动物体上进行。 2、组内试验动物的数量 要使试验结束时至少每组仍有雌、雄各10只。例如，进行为时24个月的慢性毒性试验，在开始试验时每组有40只大鼠，于1、3、9及12个月分别处死动物，进行病理剖检，如每次处死1～2只大鼠，则所取得的数据不足以进行统计比较，如每次处死5只以上，则在试验结束时，剩下的组内动物的数量少于20只。 （三）受试物 用于毒性试验的受试物，化学上应尽可能纯净，并且能够代表今后推广的商品。若有溶媒或赋形剂必须进行对比试验 。 （四）接毒途径、频率及剂量 一般毒理试验最常用的接毒途径是内服，在进行长时间试验时，常将受试物混料饲喂，以节省劳力。试验采用的接毒途径应与实际接毒途径一致。 三、急性毒性试验 急性毒性试验是一次给予（或在24h内多次给予）受试物后动物所产生的毒性反应。 （一）试验目的 通过急性毒性试验确定受试物的毒性，对敏感动物及毒物作用的靶器官进行初步了解，从而为亚急性、慢性毒住的试验设计提供资料。 受试物可经口或通过皮肤，吸入和注射等方法给予，内服是最常用的接毒途径，一般观察7d，观察范围可为1～28d。 表示毒性的参数，一般用LD50，此外尚有LD0（最大耐受量）、LD（致死量）、MID（最小致死量）和LD100（绝对致死量）等。 急性毒性试验可采用一种以上啮齿动物，选用试验动物的体重为：小鼠18～24g；大鼠180～240g，豚鼠200～250g；家兔1500～2000g。若对一种受试物的毒性已有一定的了解，则应选择敏感动物进行试验。例如黄曲霉毒素试验应选择雏鸭，而氰化物则应选择鸟类，因为它们对这些毒物的反应比大鼠、小鼠更敏感。 LD50的测定方法： LD50是表示在某实验总体的受试动物中引起半数死亡的剂量，其单位为mg/kg。测定LD50的方法很多，这里仅介绍一种精确方便的计算方法--简化寇氏法（kArber法）。应用寇氏法计算时，试验设计应符合以下要求： （1）剂量必须按等比级数（常按1.2～1.5）设计； （2）各组的动物数必须相等； （3）试验动物对受试物的反应情况大致符合常态分布，即要求大致有一半的组所产 生的反应率在10%与50%之间，另一半的组所产生的反应在50%与90%之间，最好还含有反应率为0%及100%的组，所以要求预试。 例：给小鼠腹腔注射敌百虫进行急性毒性试验，测定LD50。 选择体重18～