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紫阳绞股蓝主要成分分析及其功效说明 　　(西安市产品质量监督检验所，陕西西安710065) 　　摘要：文章介绍了通过高效液相色谱法与分光光度计法等多个检测方法，测定紫阳产绞股蓝的主要功效成分的过程，并将其与其他植物比较得出其具有独特的功效作用。 关键词：绞股蓝；皂甙；硒 　　中图分类号：R282.7文献标识码：A文章编号：1007—6921(XX)12—0037—02 　　绞股蓝又名七叶胆、五叶参，自然生长于陕西南部，湖北西部山区，绞股蓝在古时民间已被广泛使用，把它作为“神奇”的“不老长寿药草”。明代称之为“神仙草”。绞股蓝其名始于1525年明嘉定四年朱棣所著《救荒本草》一书，中国药典亦称绞股蓝。 　　现在查明，绞股蓝主要成分为绞股蓝皂甙(GP)，皂甙、黄酮、多糖、氨基酸、微量元素。皂甙成分：目前已分得单体皂甙83种，均属达玛脂烷醇类结构，其中绞股蓝皂甙3、4、8、X2分别与人参皂甙Rb1、Rd3、Rb、F2是同一物质，绞股蓝皂甙1酶解，得人参皂甙K3，绞股蓝皂甙V-AH与人参皂甙Rg3相同，其余均可视为原人参二醇及原人参三醇的异构体。氨基酸：共有18种氨基酸，其中有6种人体必需的氨基酸。微量元素：绞股蓝含有的各种常量元素和微量元素，人体所需的微量元素锰(Mm)、锌(Zn)、铁(Fe)等在绞股蓝中含量较高，陕西产地的绞股蓝中含有硒(Se)，黄酮类化合物，多糖。经初步分析绞股蓝、叶中均含有果糖、葡萄糖、半乳糖和低聚糖。 　　为进一步研究绞股蓝功效成分具体含量，笔者对市售紫阳县绞股蓝茶叶做了全面的成分分析，为使数据有参考性，特同时做一紫阳陕青茶叶作一对比，现将最主要功效成分分析方法陈述如下： 1绞股蓝皂甙含量测定 1.1试剂 　　甲醇(色谱纯)；水(重蒸水)；绞股蓝皂甙标准品(纯度≥98%)。 　　绞股蓝皂甙标准溶液的制备：精确称取绞股蓝皂甙标准品10mg，加流动相甲醇+水溶解并移入100mL容量瓶中，定容至刻度。 1.2仪器设备 高效液相色谱仪、附紫外检测器； 　　色谱柱：C18或具同等性能的色谱柱，150mm×6mm，5μm；超声波清洗器； 　　C18净化富集柱：C18预柱装量0.5g，分配型； 离心机：3000r/min。 1.3色谱分离条件 流动相：甲醇+水=55+45 流速：1mL/min 柱温：40℃ 检测波长：293nm 灵敏度：0.016AUFS 进样量：10μL 1.4分析步骤 　　试样制备：将固体试样粉碎成粉末状，混匀。准确称取上述经处理后的试样1.00g于50mL容量瓶中，加检测用流动相30mL溶解，经超声振提5min加流动相定容50mL，离心沉淀，上清液经滤膜过滤。 　　测定步骤：分别精密吸取标准溶液和试样溶液10μL注入高效液相色谱仪，依上述色谱条件，以保留时间定性，用外标法计算试样中绞股蓝皂甙的含量。 　　最终测得绞股蓝1#样品与2#样品皂甙含量为2.68,2.74，而茶叶的绞股蓝皂甙的含量为未检出。 2微量元素中硒含量的测定 2.1试剂和材料 硫酸：优级纯 　　混合酸：硝酸——硫酸——高氯酸(14+2+2) 　　乙二胺四乙酸二钠(EDTA一2Na)溶液：0.1％ 盐酸羟胺溶液：10％ 氨水溶液(1+1) 盐酸溶液(1+1) 盐酸溶液：0.1mol／L 　　环己烷：经测定无荧光杂质，有必要时重蒸馏后使用。 　　甲酚红指示剂：称取0.1g甲酚红，加1滴50％氢氧化钠和10mL水溶解，并稀释到50mL。 　　2，3一二氨基萘(DAN)溶液：在暗室中配制。称取0.1gDAN，加0.1mol／L盐酸溶液100mL，振摇使其溶解。将溶液转入250mL分液漏斗中，加20mL环己烷，剧烈振摇5min，静置分层后，弃去环已烷相。再加入20mL环己烷，重复萃取三次，收集水相于100mL棕色容量瓶，用水定容并覆盖一层环己烷，储存于冰箱中，每次临用前再用20mL环己烷萃取一次。 　　硒标准溶液：准确称取0.1000g硒(纯度≥99.9％)，加5mL硝酸，温热使其溶解；加水稀释到100mL，此溶液每毫升相当于100pg硒。硒标准工作液：吸取10.0mL硒标准溶液置于100mL容量瓶，以0.1mol／L盐酸溶液稀释至刻度，混匀，依次稀释到每毫升相当于0.1pg硒。 2.2仪器和设备 荧光分光光度计 凯氏烧瓶：250mL 分液漏斗：125mL，250mL 电热恒温水浴锅 控温电炉 具塞三角烧瓶：100mL 具塞刻度试管：5mL 　　称取1.00g样品置于250mL凯氏烧瓶中，用少量水润湿样品，加入18mL混合酸，在控温电炉上加热消化。应逐渐升高温度，消化至冒高氯酸白烟，保持1min，此时溶液呈无色或浅黄色，即为消化终点(在消化过程中如出现炭化现象