法定量测定人血浆中阿司匹林及其代谢产物水杨酸.PPT

(二) 主要理化性质 固体，一定的熔点，具苯环，有紫外吸收，只有苯甲酸钠溶于水。 6、氯贝丁酯的鉴别：异羟肟酸铁反应。氯贝丁酯分子中具有酯结构，与盐酸羟胺及三氯化铁作用，形成有色的异羟肟酸铁，显紫色。 （二）? 重氮化-偶合反应 对氨基水杨酸钠具芳伯氨基结构，在酸性溶液中，与亚硝酸钠液进行重氮化反应，生成的重氮盐与碱性β-萘酚偶合产生橙红色沉淀。 2、水解后剩余滴定法 酯结构在碱性溶液中水解，加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加热使药物水解，过量氢氧化钠用硫酸滴定液回滴。 注意空白 五、高效液相色谱法 阿司匹林栓剂的含量测定 丙磺舒原料的含量测定 第五节 体内药物分析 血清中阿司匹林和水杨酸的HPLC法测定 尿中丙磺舒的固相萃取-HPLC法测定 血浆中布洛芬的HPLC测定 血浆中二氟尼柳的固相萃取-反相HPLC测定 LC - MS/MS法定量测定人血浆中阿司匹林及其代谢产物水杨酸 方法的定量下限(LOQ)为25 ng/mL, 灵敏度较高, 其人血浆中阿司匹林和水杨酸在25～10 000ng/mL范围内, 其浓度与响应值之间具有良好的相关性, 全部标准曲线的相关系数( r)均在0.990～1.000之间, 方法的日内和日间精密度、准确度符合要求(RSD≤15% , RE≤15% ) 。 四、柱分配－紫外分光光度法 适用：片剂、胶囊、栓剂 特点：能分离杂质，同时测定ASA、SA （1）SA的限量测定 色谱柱用硅藻土填充。 固定相：三氯化铁－尿素 流动相：氯仿，乙醚 在λmax=306nm测定吸收度，A样（SA) ＜ A标（SA) （2）ASA的测定 固定相：碳酸氢钠 流动相：氯仿 λmax=280nm测定吸收度，A样（ASA+SA) -A样（SA) * * 第六章 芳酸及其酯类药物分析 一、苯甲酸类 第一节、典型药物分类与理化性质 丙磺舒（pKa3.4） 羟苯乙酯 二、水杨酸类 贝诺酯 结构性质： 1、具有芳环、羧基及其它取代基团。 2、具有游离羧基呈酸性，可成盐或酯。 3、pka=3～6，酸性比盐酸、硫酸弱，比碳酸、苯酚强。 4、含共轭体系，在一定波长处有UV吸收。 5、均有红外吸收 酸性：受苯环、羧基和取代基的影响 取代基为-X，-NO2，-OH时酸性比苯甲酸强 原因：吸电子效应，使羧基中-OH极性减弱，较易离解出质子，故酸性增强。 取代基为-CH3，-NH2， 酸性比苯甲酸弱 原因：斥电子效应，增加苯环电子云密度，增加-OH极性，不易离解出质子，使酸性降低。 氯贝丁酯 三、其他芳酸类 布洛芬 第二节、鉴别试验 （一）与铁盐 反应 1、水杨酸及其盐 反应条件：弱酸性（pH4~6） 反应现象：紫堇色 2、阿司匹林需加热水解后与FeCl3反应 方法：取本品0.1g 煮沸放冷 显紫堇色 加水10ml 加FeCl3 1d 3、苯甲酸（钠）与三氯化铁生成褐色沉淀 4、丙磺舒与三氯化铁成米黄色沉淀 5、布洛芬：与高氯酸羟胺及N，N-双环己基羧二亚胺混合，再与高氯酸铁反应显紫色 三、氧化反应 甲酚那酸遇硫酸显黄色 （四）水解反应：阿司匹林与碳酸钠试液反应 反应现象：水杨酸白色沉淀析出，并产生醋酸的臭气 五、分解产物的反应 苯甲酸盐-升华 含硫药物-与氢氧化钠、硝酸反应产生硫 酸盐，或加热产生二氧化硫。 六、紫外吸收光谱 七、红外吸收光谱法 八、薄层色谱法 九、高效液相色谱法 第三节、特殊杂质检查 ? （一） 阿司匹林（ASA）合成工艺： （二）检查： 1、溶液的澄清度： （1）杂质来源：①原料②合成工艺中由副反应生成的醋酸苯酯、水杨酸苯酯和乙酰水杨酸苯酯等。 （2）检查原理：利用药物与杂质在溶解行为上的差异进行检查 （3）检查方法： 取供试品0.5g 溶液应澄清 用45℃的碳酸钠试液10ml 2、??游离水杨酸（SA）----特殊杂质 （1）来源：①生产过程乙酰化不完全（未反应SA） ②贮存不当水解而产生的SA （2）检查原理：阿司匹林+硫酸铁铵 不反应 水杨酸+硫酸铁铵 紫堇色 与一定量水杨酸对照液生成的色泽比较，不得更深。 对氨基水杨酸钠中特殊杂质-间氨基酚 离子对-HPLC法：分离有机离子 -COOH、-SO3H 基