遗传信息传递-1.ppt

第七章 遗传信息的传递;DNA;;遗传信息传递的中心法则概述; 中心法则总结了生物体内遗传信息的流动规律，揭示遗传的分子基础，不仅使人们对细胞的生长、发育、遗传、变异等生命现象有了更深刻的认识，而且以这方面的理论和技术为基础发展了基因工程，给人类的生产和生活带来了深刻的革命。;第一部分 DNA的生物合成 第二部分 RNA的生物合成 第三部分 蛋白质的生物合成;DNA的每一条链都含有合成它的互补链所必需的全部遗传信息。 DNA在复制时，两条链解开分别作为模板，在DNA聚合酶的催化下按碱基互补的原则合成两条与模板链互补的新链，以组成新的DNA分子。这样新形成的两个DNA分子与亲代DNA分子的碱基顺序完全一样。;由于子代DNA分子中一条链来自亲代，另一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制(semiconservation replication) 。;A G G T A C T G C C A C T G G;如何证明？;DNA以半保留方式进行复制，是在1958年由M. Meselson 和 F. Stahl 所完成的实验所证明。;密度梯度实验;按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。 DNA的半保留复制表明DNA在代谢上的稳定性，是保证亲代的遗传信息稳定地传递给后代必要措施。;复制起始点： DNA复制要从DNA分子的特定部位开始，此部位称复制起始点。 复制子(Replicon) 基因组能独立进行复制的单位称为复制子，每个复制子都含有一个复制起点。它是复制的功能单位。; 在复制的起始点处，DNA双链部分解开为单链，形成叉子形状称复制叉（replication fork）。;2.2 DNA复制的起点和方向的类型 1) 两个起点，两个生长端的相向复制 DNA每条链有1个复制起点，分别合成1条新DNA，两条新链相向合成，每个生长点只有1条链合成，这种方式存在于线性DNA病毒。 2) 1个起点，1个复制区的单向复制 DNA两条链的复制起始点在同一位置，复制向一个方向运动，两条DNA链均被复制，这种方式偶见于一些环形DNA的复制。 3) 1个起点，两个复制区的双向复制 这种DNA复制方式最为普遍，复制起始于1个位点，形成两个复制区向相反方向运动，在每个复制区两条DNA链均被复制。;DNA复制的起点和方向示意图;原核细胞DNA复制只有一个复制起始区，因此它只有一个复制子。通常细菌、病毒和线粒体的DNA分子都是作为单个复制子完成复制的。 真核生物的染色体DNA是线形双链分子，含有许多复制起点，因此是多复制子，每个复制子约有100-200Kbp。人体细胞平均每个染色体含有1000个复制子 病毒DNA多种多样，环状或线形，双链或单链，但都是单复制子。 ;E.Coli DNA复制起点的gene mapping;E.Coli染色体DNAθ复制: 复制时有一个复制起点，双向展开，形成θ状中间物，直至两个复制叉相遇，这种复制称θ复制。 ;亲代双链（或单链）DNA的一条链在DNA复制起点处被切开，其5‘端游离出来。DNA聚合酶Ⅲ便可以将脱氧核糖核苷酸聚合在3’-OH端。当复制向前进行时，亲代DNA上被切断的5‘端继续游离下来，并且很快被单链结合蛋白所结合。因为5’端从环上向下解链的同时伴有环状双链DNA环绕其轴不断的旋转，而且以3‘-OH端（+）为引物的DNA生长链则不断地以另一条环状DNA链（-）为模板向前延伸，因而称为滚环(Rolling circle)复制。 ;双链环在固定点解开进行复制，但两条链的合成是高度不对称的，一条链先复制，另一条链保持单链而被取代，在电镜下可以看到呈D环形状。待一条链复制到一定程度，露出另一链的复制起点，另一条链才开始复制。这表明复制起点是以一条链为摸板起始合成DNA的一段序列；两条链的起点并不总在同一点上，当两条链的起点分开一定距离时就产生D－环（D-loop）复制。;3 原核细胞的DNA复制;;3.2.1 DNA聚合酶(DNA Polymerase);大肠杆菌DNA聚合酶;1956年Kornberg等在E.coli中发现的第一个DNA聚合酶，是DNA复制研究中的重要里程碑，因此于1959年获得诺贝尔化学奖。;功能 （1）5′→3′聚合作用 （2）3′→5′核酸外切酶的活性 （3）5′→3′核酸外切酶的活性 （4）焦磷酸解作用 （5）焦磷酸基交换的作用 因此它属于一种多功能酶;用胰蛋白酶或其他蛋白水解酶处理DNA pol I可以得到两个片段。;;5? 至 3? 的聚合活性，催化的反应： ;DNA pol I 5′?3′聚合作用示意图;酶的专一性主要表现为新进入的脱氧