缺氧诱导因子-1α对结直肠癌细胞上皮间质转化及侵袭迁移-天津医药.PDFVIP

天津医药2016年5月第44卷第5期 535 缺氧诱导因子-1α对结直肠癌细胞上皮间质转化及 侵袭迁移的影响 1 1 2 1,3 1 1,3 1,3 1,3 1,3,4△ 吴丽丽 ，孙慧誌 ，孙冉 ，赵楠 ，王勇 ，古强 ，董学易 ，刘芳 ，孙保存 摘要：目的 探讨缺氧是否能促进不同分化程度结直肠癌细胞上皮间质转化（EMT），并分析缺氧对结直肠癌细 胞侵袭、迁移的影响。方法 分别选取HCT116（低度分化）和HT-29（高度分化）结直肠腺癌细胞。观察0、10、25、 50、100及 150mg/L氯化钴（CoCl）诱导2种细胞48h后的形态变化。分析0、10、25、50及 100mg/LCoCl 处理48h 2 2 后缺氧诱导因子（HIF）-1α蛋白表达变化，筛选出CoCl 诱导细胞缺氧的最适合浓度。MTT实验检测不同时间点（0 、 2 24 、48 、72及96h）CoCl 诱导2种结直肠癌细胞的增殖情况，筛选出CoCl 诱导缺氧的最佳时间。最佳浓度和时间 2 2 条件下，对HCT116和HT-29细胞分别进行缺氧（缺氧组）和常氧（常氧组）处理，Transwell侵袭和划痕实验检测2组 2种细胞的侵袭、迁移情况；Westernblot实验和RT-PCR实验检测2组HIF-1α、E-cadherin及Vimentin 的蛋白及 mRNA表达水平。结果 50mg/LCoCl 作用48h时2种细胞均出现明显的形态改变。2组HCT116、HT-29细胞的 2 HIF-1α蛋白表达水平随CoCl 浓度增加均呈先增后减趋势，50mg/L为最适宜浓度（P0.05）。0~96h时2种细胞不 2 论有无缺氧，细胞增殖能力均呈先增后减趋势（P＜0.05），48h为最佳作用时间。HCT116和HT-29细胞系中缺氧组 穿膜细胞数和细胞迁移率均明显高于常氧组（P＜0.05）。HCT116、HT-29细胞系中缺氧组HIF-1α、Vimentin 的蛋白 和mRNA表达水平均高于常氧组，而E-cadherin 的蛋白和mRNA表达水平低于常氧组（均P＜0.05）。结论 缺氧 能诱导不同分化程度结直肠癌细胞均发生EMT，并能增强2种结直肠癌细胞的侵袭、迁移能力。 关键词：缺氧诱导因子 1，α亚基；结直肠肿瘤；上皮间质转化；细胞增殖；肿瘤侵润；细胞运动 中图分类号：R735.34 文献标志码：A DOI：10.11958 EffectsofHIF-1αonepithelial-mesenchymaltransition,invasionandmigrationin colorectalcancercells 1 1 2