中药化学第三章.pptVIP

5．酶水解反应 选用一定的酶（工具酶）水解苷键的反应。酶催化水解有两个特点： 如： 转化糖酶（β－果糖苷酶）：水解β－果糖苷键 麦芽糖酶： 水解α－葡萄糖苷 杏仁苷酶（苦杏仁苷酶）： 水解β－葡萄糖苷键 樱叶酶： 水解樱叶苷 利用工具酶可测 再检识可知蔗糖由果糖和glu组成，而且果糖是以β—苷键与glu相连。 经检识除可知苦杏仁苷由2个glu和杏仁腈组成外，还可知2个苷键中一个是β—苷键， 另一个是氰苷。 一般可用 注意： 并不是所有的α—糖苷酶或β—糖苷酶都能将所有相应的 构型苷键切断，即能用工具酶切断的苷键应是相应的α—苷键或β—苷键，但不被工具酶所切断的苷，则不一定就不是相应的α—苷键或β—苷键。 第三节 糖和苷的提取及分离 一．提取 （一）糖类的提取 糖是强亲水成分，一般利用其溶于水和稀醇，不溶于亲脂性有机溶剂的性质提取纯化。 1. 提取注意 （1）杀酶 加热回流或加入 无机盐（如碳酸钙）破坏酶活性。 （2）中和酸 若有酸性成分共存，碳酸钙、碳酸钠等中和。 （3）防霉变 低温保存提取液。 2. 方法 (1) 提取单糖及低聚糖 也可用大孔树脂代替活性炭脱色纯化 。 （2）多糖以及大分子量的低聚糖 除用水及稀醇外（中性多糖），还可用稀碱、稀盐溶液或二甲基亚砜提取（酸性多糖）。用乙醇、甲醇、丙酮（中性多糖）或乙酸、盐酸、铜盐（酸性多糖）沉淀纯化。 （二）苷类的提取 苷由于苷元结构不同，连糖的种类，数目，苷键位置不同，则其溶解性，酸碱性，极性等理化性质差异很大，要用一章中的一个小节讲完苷的提取分离是不可能的。然而苷毕竟却都连糖，都具有苷键，因此在设计提取时，多少有一些相似之处，这里讲一下其提取设计的基本构思。 1. 提取注意 （1）提取原生苷：防苷键裂解，鲜药材迅速干燥，用沸水，甲醇，乙醇提取或碳酸钙拌匀药材沸水提取以杀酶，不用或少用强酸或碱防苷键水解。 (2) 提次级苷 ：保酶活性（温度，湿度），先酶解，再提取。 (3) 中和酸 ： 若有酸性成分共存，碳酸钙、碳酸钠等中和。 (4) 防霉变 苷的水提液长时间放置应冷藏或加防腐剂。 2．提取 不同苷的溶解性差异虽然很大，但相对来说 ，多数苷易溶于甲醇，乙醇，乙酸乙酯，亲脂性强苷溶于氯仿 。 提取苷时多利用这样一些性质进行。如： 也可先用沸水提，但水提液中糖类杂质较多，给后来的提取分离造成过滤等诸多麻烦，但工厂多用沸水，再用乙醇沉淀除去多糖类，成本低。 大量 的苷的水提液可用大孔树脂吸附纯化替代正丁醇萃取纯化。 （三）苷元的提取 苷元多属脂溶性成分，可用亲脂性有机溶剂提取。 注意防止苷元酸水解时的结构变化。 有时也可先提取出总苷，再将总苷水解为苷元，继用亲脂性有机溶剂提取。 二、糖和苷类的分离 (一) 糖的分离 糖类化合物极性均较大，一般要经色谱法才能拿到单体（含量很高的单糖或二糖，有可用结晶法拿）。 1． 单糖和低聚糖 常用于分离糖的色谱法有活性炭、大孔吸附树脂、纤维素等，硅胶及反相硅胶也有运用。 2．多糖 分级沉淀法 凝胶滤过色谱 超速离心法（分子量差异）、透析法（除去小分子杂质）、电泳法（酸性多糖）季铵氢氧化物沉淀法（CTA-OH,cetyl trimethyl ammonium hydroxide, CPOH,cetylpyridium 可与酸性多糖产生沉淀）。 氢氧化三甲基十六铵 氢氧化十六烷基吡啶 (二) 苷的分离（纯化） 设计分离苷的基本构思是利用苷元结构及糖的种类，数目，苷键的位置不同所引起的溶解性，酸碱性，极性及分子量等理化性质的差异，选择相应的方法将苷与杂质分离。 1．非色谱法 (1) 沉淀法 （2） 铅盐沉淀法 如: （3）色谱法 非极性大孔树脂用得较多，极性及中等极性大孔树脂近年来也逐渐有所应用 目前银杏叶提取物等许多苷的部位性提取物多用大孔树脂分离纯化。 第四节 糖和苷类的检识 这里主要讲糖（包括苷中的糖）及苷的通用型检识，特殊糖（α-去氧糖）及各类苷元的检识以后专章讲解。 一. 颜色及沉淀反应检识 糖和苷的供试品要先按前述方法纯化后，再做检识，苷的检识要结合苷元的