革兰阳性球菌 PPT.ppt

β溶血性链球菌鉴定 PYR试验 化脓性链球菌产生的吡咯烷酮芳基酰胺酶水解吡咯烷酮β-萘基酰胺，加入N，N-二甲氧基肉桂醛试剂后产生桃红色 杆菌肽（bacitracin）敏感试验 化脓性链球菌为阳性，有别于其他PYR阳性的β溶血性细菌（猪链球菌、海豚链球菌）和A群小菌落β溶血性链球菌（米勒链球菌） 此法可作为筛选试验 β溶血性链球菌鉴定 VP试验 挑取平板上孵育过夜菌落置于2ml VP肉汤中，孵育6h后加入VP试剂，摇匀30秒，出现桃红色者为阳性 该试验可鉴别A、C、G群β溶血的大、小两种不同菌落 CAMP试验 无乳链球菌能产生CAMP因子，它可促进金黄色葡萄球菌溶血能力，使其产生显著的协同溶血作用（箭头状溶血） 本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验 2．非β溶血链球菌鉴定 通过血清学测定抗原群，可将B群链球菌、非β溶血的菌株和肺炎链球菌得以鉴定 Lancefield的D群抗原可以存在于牛链球菌、肠球菌属和片球菌属，因此需要进行生化反应予以鉴别。 菌 种 optochin敏感试验 胆汁溶菌试验 胆汁七叶苷试验 肺炎链球菌 S + — 草绿色链球菌 R — — 牛链球菌 R — + 草绿色链球菌鉴定 草绿色链球菌是人体正常菌群一部分，通常不致病，目前借助于常规方法鉴定到种有一定困难，通常将其鉴定到群。 根据16SrRNA可分为温和链球菌群（mitis group）、米勒链球菌群（miller group）、变异链球菌群（mutans group）和唾液链球菌群（salivrius group） 菌 群 VP 脲酶 精氨酸 七叶苷 甘露醇 山梨醇 温和链球菌群 － － － － － － 变异链球菌群 ＋ － － ＋ ＋ ＋ 唾液链球菌群 ＋/— ＋/— － ＋ － － 米勒链球菌群 ＋ － ＋ ＋/－ ＋/― ― 商品化鉴定系统 API-Strep系统 ID32 strep系统 Microscan系统 抗链球菌溶素O抗体检测 辅助诊断风湿热、急性肾小球肾炎 活动性风湿热患者抗体效价一般超过400单位 药物敏感性试验 链球菌属细菌药敏试验选择抗生素：A组为红霉素、青霉素或氨苄西林等；B组为头孢吡肟、头孢噻肟或头孢曲松等；C组为氧氟沙星、左氧氟沙星等。 A组为常规首选药敏试验药物； B组为临床使用主要抗生素； C组为对A组药物耐药的菌株或对A药过敏者 青霉素是抗链球菌的首选药物 6．其他鉴定试验 常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试验 鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、β-半乳糖苷酶、3-羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘菌素B耐药试验、糖产酸试验 （五）肠毒素检测 动物学试验 经典的方法是采用幼猫腹腔注射(肉汤培养物或呕吐物)，4h 内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提示金黄色葡萄球菌肠毒素存在 琼脂扩散试验或ELISA法测定 用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有无沉淀线产生 将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心ELISA法检测样本中的肠毒素 药物敏感性试验 葡萄球菌属细菌药敏试验常规首选抗生素为苯唑西林和青霉素；临床常用药物是阿齐霉素、克林霉素、甲氨苄啶、万古霉素等 耐甲氧西林葡萄球菌(methecillin resistant Staphylococcus，MRS) 医院感染的重要病原菌 携带mecA基因、编码低亲和力青霉素结合蛋白 对β-内酰胺类、β-内酰胺/酶抑制剂类抗生素、碳青霉烯类药物耐药，绝大多数MRS为多重耐药，耐药范围包括氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类等 治疗困难、病死率高 第二节 链球菌属 链球菌属（Streptococcus） 某些菌种为毒力强的致病菌 某些菌种作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道 某些菌种是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌 一、分类 传统分类 以血平板上溶血现象 Lancefield抗原血清分型 种系分类法 链球菌属的分类较以前的分类有较大变化 抗原结构 分为A、B、C、D、F、G等20个群，A群致病菌（溶血性链球菌或化脓性链球菌） 根据蛋白抗原进一步分类M抗原 荚膜 细胞壁 蛋白质 多糖 肽聚糖 细胞膜 细胞质 1）多糖抗原（C抗原）群特异性抗原，细胞壁的多糖组分。 2）表面抗原或称蛋白质抗原：壁外的菌毛样结构含M蛋白，位于C抗原外层，具型特异性，有近100种血清型。M抗原与致病性有关。 3）P抗原或称核蛋白抗原：无特异性。 传统分类 根据链球菌在血平板上的溶血现象 甲型（α）溶血性链球菌 乙型（β）溶血性链球菌 不出现溶血的丙型（γ）链球菌 根据Lancefield抗原血清分型 分为A、B、C、D、……等20群 血清群与溶血特性没有相关性。对人类