MALDI—TOF 质谱仪关键技术及进展.pdfVIP

仅曩评介 MALDI—TOF质谱仪关键技术及进展 赵晓光 薛 燕 刘炳玉 (北京国家生物医学分析中心 北京 100850) 摘 要 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪是当前研究蛋 白质组不可缺少的质谱 仪，已经得到广泛的应用，本文对这种仪器的结构原理、构造特点、关键技术和最新进展等 作简要介绍。 关键词 生物质谱 基质辅助激光解吸电离 飞行时间质谱仪 蛋 白质 蛋 白质组 内含有分子涡轮泵和旋叶机械泵。可选附件有 自动 管理多个样品靶的机械手、CID、PSD和分析高分子 80年代末期，由于基质辅助激光解吸电离(Ma． ， ’ 聚合物的检测器、SNP等专用软件。用于蛋 白质组 trixAssistedI丑serDesorptionIonization，简称 MALDI) 学研究的配套设备有：自动切胶仪和样品处理仪，自 和电喷雾电离(ElectronspmyIoniaztion，简称 ESI)技术 动完成切胶和批量处理从样品容器到样品靶的全过 的发明，有机质谱获得突破性进展，开创有机质谱分 程。表 1是BrukerautoflexMALDI—TOF实测性能指 析研究生物大分子的新领域。蛋 白质组是 目前生命 标，作为选用参考。 科学研究的最前沿领域，是在细胞或组织水平上对 蛋 白质进行的大规模的分离纯化和鉴定分析。此过 程主要包括，分离纯化与研究 目的相关的蛋白质，蛋 白质的鉴定，蛋 白质的细致研究。’其中，蛋 白质快 速、准确的鉴定是蛋 白质组学研究中的关键一步，在 蛋 白质组学中起着桥梁的作用。由于基质辅助激光 解吸电离飞行时间质谱仪 (简称 MALDI—TOF)具有 灵敏度高、高通量、快速、准确、制样简单、结构简单 、 易于实现 自动化等特点，因而成为蛋 白质质谱两步 快速鉴定法中的首选设备 (其次是 ESI—MS／MS串 联质谱)。由于巨大的应用需求，近年来国内MALDI — TOF质谱仪市场增长迅速，仪器进步也很快，关心 和应用的也人越来越多，例如 1993年从英 国VG公 图1 BrukerautoflexMALDI—TOF的外形图 司(现 Micromass)引进 TofspecMALDI—TOF，2001和 表 1 BrukerautoflexMALDI—TOF性能指标 2OO2年分别引进德国Bruker公司 REFLEXm和英国 Micromass公司的M@LDIRTMMALDI—TOF等国际顶 质量范围 )35ooooDal 分辨率 线性分辨率)4476(样品为多肽) 尖的生物质谱仪，2003年又引进 Bruker公司高通量 反射模式的分辨率180∞(样品为胰岛素) autoflexMALDI—TOF，由此可见一斑。 目前国内介 线性模式的 lfmol，信噪 比大于 10：1(样品为多 绍 MALDI—TOF的文章还不多，但大部分侧重应用， 灵敏度 ： 肽) 本文将结合工作实践，着重介绍 MALDI—TOF结构 的 灵敏度 原理、构造特点、关键技术和最新进展 。