人肺癌A549细胞直接暴露可吸入物质体外试验方法的建立及应用.PDFVIP

43 3 Vol． 43 No． 3 第 卷 第 期 卫 生 研 究 382 2014 5 JOUＲNAL OF HYGIENE ＲESEAＲCH May 2014 年 月 :1000-8020 (20 14 )03-0382-05 · · 文章编号 论著 人肺癌A549 细胞直接暴露可吸入物质体外试验 方法的建立及应用 鱼涛 刘黎 肖经纬 李斌1 ， 100050 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所 北京 : A549 摘要 目的 建立人肺癌 细胞直接暴露可吸入 物质体外试验方法并进行 初步 的应 用。方法 将 二 氧 化 氮气体 用 洁 净 空 气稀释后分别 配制 成 5. 1、10. 7 、 15. 0 、20. 7 mg / m3 ， A549 ， 在 多孔膜上生长的 细胞放置在水平扩散染毒仓 内 通过 气液 ( ALI) ，15 ml / min ，37 ℃ 1 h ， 界面技术 暴露 于不 同浓度的 二氧化 氮气体 染毒 利用 MTT 和 NUＲ 试验检 测细胞毒 性; 采集 不 同工 况下的汽 油发 电机 尾气 ，10 ml / min ， 37 ℃ A549 15 min ， CCK-8 MTT 。 染毒 细胞 利用 和 试验检测细胞毒性 结果 细胞存 3 NO ( 5. 1 ～ 20. 7 mg / m ) ( P ＜ 0. 05) ， 活率随着 2 气体 浓度的升 高 显著 降低 并且呈剂 - ( MTT : y = 0. 989 － 0. 021x Ｒ2 = 0. 84 ，P ＜ 0. 0 1; NUＲ 量 效应关系 拟合 曲线 MTT NO2 拟合 曲线: y NUＲ = 1. 032 － 0. 026x