仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗C500株生产工艺的优化-中国兽药杂志.PDFVIP

　２０１７，５１（３）：２７～３１／马 明，等 中国兽药杂志 ·２７· 仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗 Ｃ５００株 生产工艺的优化 １，２ １，２ １，２ １，２ １，２ １，２ １，２ 马 明 ，王 帅 ，刘 涛 ，杨保收 ，朱秀同 ，郁宏伟 ，赵玉龙 （１．瑞普（保定）生物药业有限公司，河北保定０７１０００；２．河北省兽医生物技术工程技术研究中心，河北保定０７１０００） ［收稿日期］２０１６－１２－１３　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００２－１２８０（２０１７）０３－００２７－０５　［中图分类号］Ｓ８５９．７９７ ［摘　要］　为优化仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗生产工艺，对细菌生长曲线、耐热保护剂和冻干 曲线进行了研究，建立了发酵体积１％、２％和３％的二级种子接种量下分别发酵１２ｈ～２０ｈ的细菌 生长曲线，检测３个配苗比例、４种耐热保护剂和３条冻干曲线下成品疫苗的冻干菌存率、活菌 存活率和安全性，确定了接种３％二级种子液发酵培养１７ｈ为最佳发酵培养条件，发酵菌数达到 ８ ４２８×１０ＣＦＵ／ｍＬ；最佳配苗比例为菌液 耐热保护剂１∶１（Ｖ∶Ｖ），优化保护剂Ｂ作为最佳耐热保护 剂，设定冻干程序３＃作为最佳冻干曲线。基于此，仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗抗原含量达到 ４０头份／瓶，冻干菌存率和活菌存活率均达到９５％以上，大幅度降低了猪体免疫副反应，极大提升 了疫苗的产品品质。 ［关键词］　仔猪副伤寒；耐热保护剂；发酵；配苗；冻干曲线 ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎＰｒｏｃｅｓｓｏｆＰｉｇｌｅｔＰａｒａｔｙｐｈｕｓ Ｔｈｅｒｍｏ－ｓｔａｂｌｅＬｉｖｅＶａｃｃｉｎｅＳｔｒａｉｎＣ５００ １，２ １，２ １，２ １，２ １，２ ＭＡＭｉｎｇ ，ＷＡＮＧＳｈｕａｉ ，ＬＩＵＴａｏ ，ＹＡＮＧＢａｏ－ｓｈｏｕ ，ＺＨＵＸｉｕ－ｔｏｎｇ ， １，２ １，２ ＹＵＨｏｎｇ－ｗｅｉ ，ＺＨＡＯＹｕ－ｌｏｎｇ （１．Ｒｉｎｇｐｕ（Ｂａｏｄｉｎｇ）ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏ，Ｌｔｄ，Ｂａｏｄｉｎｇ，Ｈｅｂｅｉ０７１０００，Ｃｈｉｎａ； ２．ＨｅｂｅｉＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＰｒｏｄｕｃｔｓ，Ｂａｏｄｉｎｇ，Ｈｅｂｅｉ０７１０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｏｆｐｉｇｌｅｔｐａｒａｔｙｐｈｕｓｔｈｅｒｍｏ－ｓｔａｂｌｅｌｉｖｅｖａｃｃｉｎｅ，ｔｈｅ ｂａｃｔｅｒｉａｌｇｒｏｗｔｈｃｕｒｖｅ，ｈｅａｔ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅａｇｅｎｔａｎｄｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｙｉｎｇｃｕｒｖｅｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅｂａｃｔｅｒｉａｌ ｇｒｏｗｔｈｃｕｒｖｅｓｗｅｒｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎ１２ｈｔｏ２０ｈａｆｔｅｒｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎｏｆ１％，２％ ａｎｄ３％ ｓｅｃｏｎｄａｒｙｓｅｅｄｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｖａｃｃｉｎｅｓ’ｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｉｅｄｂａｃｔｅｒｉａｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅ，ｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｏｆｌｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｓａｆｅｔｙｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｏｎｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｔｈｒｅｅｒａｔｉｏｎｓｏｆｂａｃｔｅｒｉａｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｈｅａｔ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅａｇｅｎｔ，ｆｏｕｒｈｅａｔ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅａｇｅｎｔｓａｎｄｔｈｒｅｅｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｙｉｎｇｃｕｒ