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猪瘟活疫苗制备方法及相关知识 —刘彦龙 目　录 猪瘟简介 猪瘟简介 猪瘟俗称“烂肠瘟”，是由黄病毒科猪瘟病毒属的猪瘟病毒引起的一种急性、发热、接触性传染病。以出血和发热为主要特征，并引起妊娠母猪流产、胎儿畸变、慢性营养性消耗、淋巴细胞和血小板减少等免疫系统受损、继发或并发细菌或其他病毒感染等临床表现，呈急性或慢性经过，是一种对猪危害性极大的传染病，被国际兽疫局(OIE)列为必须上报的疾病。 特征是：急性，呈败血性变化，实质器官出血，坏死和梗死；慢性呈纤维素性坏死性肠炎，后期常有副伤寒及巴氏杆菌病继发。 是猪的一种急性接触性传染病，又称猪霍乱。1885年首先在美国发现，以后传播到世界各大洲。中国大部分省都有发生。1903年美国兽医学家德希尼兹和多赛特鉴定本病的病原是黄病毒科的瘟病毒属（Pestivirus）中的猪瘟病毒。主要通过直接接触，或由于接触污染的媒介物而发病。消化道、鼻腔粘膜和破裂的皮肤均是感染途径。一年四季都可发生，以春夏多雨季节为多。 猪瘟简介 猪瘟发现历程： 猪瘟于1833年首先发现于美国的俄亥俄州。 1885年，Salmon和Smith等对猪瘟和沙门氏菌病及猪丹毒作了鉴别诊断。 1903年，DeSchweinitz和Dorset两氏证明猪瘟的病原体是病毒。 匈牙利的Hutyra Koves于1908年制成猪瘟高免血清，说明那时欧洲已存在猪瘟。 日本于1909年第一次发现并开始研究猪瘟（Sasahara，1970）。 中国何时发现和证明猪瘟存在，没有明确的文字记载。约于1925年，东南大学农科开始研制免疫血清防制猪瘟。 猪瘟简介 目前已经定位的CSFV蛋白有5种，即 Npro、C、Erns(E0）、E1和E2．它们均由CSFV的 RNA-ORF5’一端所编码。在结构蛋白中，最具有免疫防制研究价值的是EO和E2。 HCV病毒囊膜有55ku和46ku两种糖蛋白，核衣壳则为36ku蛋白质构成。HCV和同属的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的基因组序列有高度同源性，抗原关系密切，既有血清学交叉反应，又有交叉保护作用。 HCV为单一血清型，尽管分离不少变异株，但都属于一个血清型。HCV野毒株毒力差异很大，有强、中、低、无毒株以及持续感染毒株之分。强毒株引起死亡率高的急性猪瘟，中毒株一般产生亚急性或慢性感染，低毒力猪瘟病毒可感染胎儿引起轻微临诊症状或亚临诊感染，但胚胎感染或初生猪感染可导致免疫失败和死亡。无毒力株能引起高度病毒血症，但不表现任何临诊症状，呈持续感染。 病原学 HCV对环境的抵抗力不强，但存活的时间部分取决于含毒的介质。血液中的病毒在56℃60min可被灭活，60℃10min可使其完全丧失致病力。而脱纤血中的病毒在68℃30min尚不能灭活。病毒在冻肉及其制品中可以存活6个月之久。在猪粪便中HCV于20℃可存活2周，4℃可存活6周以上。病毒对乙醚、氯仿和去氧胆酸盐等脂溶剂敏感。病毒在PH5~10条件下稳定，过酸或过碱能使病毒失活，氢氧化钠、漂白粉等溶液中很快失活，2%的氢氧化钠仍是最合适的消毒剂。 病原学 一、临床症状 根据病程长短、临床症状和特征的不同分为：最急性型、急性型、亚急性型、慢性型、温和型和迟发型。 　　1、潜伏期5-7天，体温升高持续41度左右 　　2、眼结膜潮红，眼角有多量粘性或脓性分泌物。注意:清晨两眼黏合 　　3、全身有许多出血斑 　　4、公猪包皮积尿 　　5、病猪前期便秘，后期腹泻 　　6、死亡率50%以上 　　目前单纯的猪瘟感染病例比较少见，常与蓝耳、伪狂、链球等多种疾病混合感染，其临床表现既有猪瘟的症状，又有其他疾病的症状，各种症状都不典型，但大多数猪的皮肤上都有出血点或出血斑。 症状及病理 二、剖检病变 猪瘟病毒主要是损伤小血管内皮细胞，引起组织器官出血，对猪瘟有诊断意义，特别是皮肤、肾脏、淋巴结、脾脏出血。 1、皮肤出血多见在颈部、腹股沟、四肢内侧 2、全身性出血性淋巴结炎表现非常突出。尤以颌下淋巴、腹股沟淋巴、肠系膜淋巴最为明显。淋巴结肿大呈暗红，切面湿润多汁，隆突，边缘的髓质呈鲜红色或暗红色，围绕淋巴结中央皮质并向皮质内伸延，形成大理石花纹，整个淋巴结严重出血时犹如血肿，切面见淋巴组织几乎全部被血液取代。此种变化对猪瘟有一定的诊断意义。 3、肾脏肿大，色泽变淡，表面散步数量不等的点状出血，多则密布整个表面，形似麻雀蛋外形，故称为雀蛋肾，切面无论皮质或髓质都可以见得到针尖大至粟粒大的出血点。 症状及病理 症状及病理 4、脾脏通常不肿大或轻微肿胀，脾脏边缘数量不等的粟粒大至黄豆大暗红色不正圆形的出血性梗死灶，这又是猪瘟的特征性病变。 5、各粘膜、浆膜和器官的出血也很明显，尤其是泌尿生