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HLA检测技术与应用-河南省红十字血液中心PPT
PCR-SSO(序列特异性寡核苷酸探针) 杂交条方法 基因芯片方法 流式荧光微珠 芯片的工作原理 将HLA基因的PCR产物固定在基片上 荧光标记的序列特异性探针杂交 探针 1 探针 2 探针 3 探针 n … ...... 杂交图谱 汇总每条探针数据得到所有样品的分型结果 由计算机自动判读分型结果 HLA分型方法 比较项目 PCR-SSP PCR-SSO杂交条 PCR-SSO微珠法 PCR-SSO芯片法 DNA测序方法 技术要求 低 低 较高 高 高 分 辨 率 中低 中低 中高 中高 高 检测通量 低 一般 较高 高 较高 使用设备 少 少 较多 多 较多 环境污染 EB致癌 轻微 轻微 轻微 轻 操作步骤 简单 简单 较复杂 复杂 较复杂 检测成本 低 低 较高 高 较高 适用范围 临床或小批量 临床、较大批量 中、大批量 大批量 临床、各种批量 应用情况 国内临床 国内临床 骨髓库 国家芯片中心 国外常规采用 河南省红十字血液中心 张伯伟 2012年8月 烟台 血型 HLA概念 检测方法 HLA的应用 HLA与临床输血 血型:血液中各种成分的遗传(表现)多态性标志 血液成分:红细胞,白细胞,血小板,血清蛋白 遗传多态性表现:细胞表面,血浆中的各种特异性蛋白 多态性的遗传基础:基因(染色体上的核酸序列) 输血治疗的需要促使“血型”发现 15世纪后期开始输血 1900年Landsteiner发现人类红细胞ABO血型 1927年发现MN血型系统 1940年发现Rh血型 HLA1958年法国J.多赛发现 HLA-I类分子 HLA-II 类分子 参与内外抗原肽的处理,呈递. 自我识别的信号 某些病毒,细菌进入细胞的受体 与某些疾病的发病有关,如:B27与强直 性脊柱炎(AS) (二)HLA复合体的遗传特征 1. 单元型遗传 2. 多态性现象 (1)复等位基因 (2)共显性表达 3. 连锁不平衡 HLA-Ⅰ类分子的分布 1. 存在于有核细胞(含血小板和网织红细胞) 表面。 淋巴细胞 肾、肝脏、心脏 神经组织、成熟的滋养细胞 2. 存在形式 (1)膜结合:有核细胞表面 (2)可溶性:存在于血清、初乳和尿液等体液中。
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