核素标记化合物-检验核医学PPT.pptVIP

2、间接标记法 又称联接标记，用于标记分子上不含酪氨酸、组氨酸或色氨酸残基，或该残基位于分子的活性基团上，直接标记后影响分子生物活性的蛋白质或多肽。 先将放射性碘标记在一个较为活泼的载体分子上（如Bolton-Huntor试剂），然后再将这个小分子蛋白质或多肽结合，完成标记。 蛋白质、多肽的碘标记 间接标记法特点 避免了蛋白质和氧化剂直接接触，防止在碘标记过程中氧化剂对标记分子的损伤； 需经二步标记，碘的利用率及标记率均很低； 标记时需引入一个较大的联接剂，对小分子的肽类的生物活性有影响，不适于MW 10000的小肽。 蛋白质、多肽的碘标记 （三）、核酸的碘标记 核酸是重要的生物大分子，其放射性碘化标记是将放射性碘标记到构成单元的碱基上，如尿嘧啶和胞嘧啶的嘧啶环上。方法：先将DNA加热到70℃，使之解析成单股的DNA，再用氧化剂（三氯化铊、浓HNO3）将离子碘（I-）氧化成单质碘，后者与嘧啶环上的第五位碳原子呈共价键结合，从而达到标记DNA的目的。 四、99mTc标记化合物的制备 略 * 放射性核素标记化合物 核医学教研室 第一节 概述 一、放射性核素标记化合物定义 二、放射性核素的来源 三、常用概念 一、放射性核素标记化合物 标记化合物(labeled　compound) 凡是分子中某一原子或多个原子或其化学基团被其易辨识的同位素或其他易辨识的放射性核素所取代，而成为一类易被识别的化合物，则称之为标记化合物。被放射性核素取代的化合物称为放射性核素标记化合物。这种取代过程称为标记（label） 二、放射性核素的来源 1.反应堆生产放射性核素 2.加速器生产放射性核素 3.从放射性核素发生器得到 1、反应堆原理 3、放射性核素发生器 是一种能从较长半衰期的放 射性母体核素中分离出由它 衰变而产生的较短半衰期的 放射性子体核素的装置。 放射性核素发生器 示意图 三、 几个基本概念 一、放射性浓度、放射性纯度、放射化学 纯度和放射性比活度、 二、同位素标记与非同位素标记 三、定位标记与非定位标记 一、放射性浓度、放射化学纯度和放射性比活度 1、放射性浓度 放射性浓度（radioactive concentration）: 指单位体积的溶液中含有的放射性活度，单位：Bq/L或Bq/ml。 放射性浓度= 标记化合物的放射性活度 标记化合物溶液的体积 2、放射化学纯度 放射化学纯度(radiochemical　purity，RCP）： 在一种放射性核素产品中,以某种特定化学形态存在的这种放射性核素的百分含量。 3、放射性比活度 放射性比活度a（specific activity）：定义： 单位质量所含的放射性活度。 单位：Bq/g、Bq/mg、Bq/mol、Bq/mmol等 二、同位素标记与非同位素标记 化合物中的原子被其同位素原子取代，称为同位素标记（isotopic labelling），由于标记化合物的化学、物理、生物学性质不会引起显著差异，亦称理想标记，如13N-NH3，15O-H2O 用化合物组成以外的原子标记，称非同位素标记(nonisotopic labelling)，又称非理想标记，如131I-AFP（甲胎蛋白）， 99Tcm –DTPA 三、定位标记与非定位标记 定位标记（specific labeling）：分子中的标记原子限定在指定的位置上，用“S”表示。如：S-[5-T]-尿嘧啶，其中95%以上3H标记在尿嘧啶分子的第五位碳原子的C-H键上。 非定位标记（non-specific labeling）：标记原子的结合部位无法确定，称之为非定位标记。 双标记（double labelling)：在化合物不同部位引入两种不同示踪核素称之为双标记，该化合物称为双标记化合物。 均匀标记、全标记 第二节 放射性核素标记化 合物的制备 一、放射性核素标记化合物的制备方法 二、14C、3H、32P、35S、99mTc等 标记化合物的制备 三、放射性碘标记化合物的制备 四、99mTC标记化合物的制备 （一）、化学合成法 （二）、生物合成法 （三）、同位素交换法 （四）、金属络合物法 （五）、其他标记方法 一、放射性核素标记化合物的制备方法 二、14C、3H、32P、35S等标记化合物的制备 略 三、放射性碘标记化合物 的制备 （一）、同位素交换法（略） （二）、蛋白质、多肽的碘标记 （三）、核酸的碘标记（简） 蛋白质、多肽的碘标记 一、 常见的标记方法 （一） 蛋白质、多肽碘标记的原则： 1、待标记物要有可被碘原子结合的基团。