机械破碎法精选.ppt

酶的提取与分离纯化 机械破碎法 定义：通过机械运动所产生的剪切力的作用，使细胞破碎的方法称为机械破碎法。 原理：机械运动产生的剪切力。 目的：破碎细胞，将酶从细胞或其他含酶原料中提取出来。 器械：组织捣碎机、细胞研磨器、匀浆器等。 机械破碎法主要分为研磨法、匀浆法。 这两种方法中，细胞通过高的机械剪切力被破坏。热量的产生是该法的一个缺点，而且不容易规模放大:如果一种方法可以在实验室规模下操作，我们并不知道这种方法是否在大规模生产中可行。 研磨法： 利用研钵、石磨、细菌磨球磨等器械所产生的剪切力将组织细胞破碎的方法。必要时可以加入精制石英砂、小玻璃球、玻璃粉、氧化铝等作为助磨剂，以提高研磨效果。研磨法设备简单，可以采用人工研磨，也可以采用电动研磨，常用于微生物和植物组织细胞的破碎。 匀浆法： 利用匀浆器产生的剪切力将组织细胞破碎的方法，称为匀浆法。它通常用于破碎那些易于分散、比较柔软、颗粒细小的组织细胞。大块的组织或者细胞团需要先用组织捣碎机或研磨器械捣碎分散后才能进行匀浆。匀浆器的细胞破碎程度较高，对酶的活力影响也不大。 捣碎法： 利用捣碎机的高速旋转叶片所产生的剪切力将组织细胞破碎的方法。此法常用于破碎动物内脏、植物叶芽等比较脆嫩的组织细胞，也可以用于微生物，特别是细菌的细胞粉碎。使用时，先将组织细胞悬浮于水或其他介质中，再置于捣碎机内进行破碎。 多种机械破碎方法比较 方法 技术 原理 效果 成本 举例 机械法 匀浆法（片型） 细胞被搅拌器劈碎 适中 适中 动物组织及动物细胞 研磨法 细胞被研磨物磨碎 适中 便宜 匀浆法（孔型） 须使细胞通过的小孔，使细胞受到剪切力而破碎 剧烈 适中 细胞悬浮液大规模处理 珠磨破碎法 细胞被玻璃珠或铁珠捣碎 剧烈 便宜 细胞悬浮液和植物细胞的大规模处理 THANK YOU