番茄根特异表达基因LeGRP2启动子的克隆及其在拟南芥的表达分析_李志邈精选.pdfVIP

中国农业科学 2010,43(9):1877-1882 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.09.014 番茄根特异表达基因LeGRP2启动子的克隆 及其在拟南芥的表达分析 1 1 1,2 1 1 1 1 1 3 李志邈 ，杨悦俭 ，杨 飞 ，叶青静 ，王荣青 ，阮美颖 ，周国治 ，姚祝平 ，Yong-Ling Ruan 1 2 （浙江省农业科学院蔬菜研究所/ 中澳作物改良研究中心，中国杭州 310021 ； 浙江师范大学化学与生命科学学院，中国金华 321004 ； 3 School of Environmental and Life Sciences, University of Newcastle, Callaghan, NSW 2308, Australia ） 摘要：【目的】克隆获得番茄根特异表达启动子，为利用基因工程技术创制番茄新种质奠定基础。【方法】利 用 Clontech 公司的基因组步移（genome walking）技术，扩增番茄根特异表达基因 LeGRP2 的上游调控序列，并 构建植物表达载体，利用农杆菌介导法转化拟南芥，以GUS 为报告基因研究该调控序列的组织表达特异性。【结果】 以番茄基因组 DNA 为模板，经过 2 次基因组步移，获得了 LeGRP2 基因上游 1 959 bp 的调控序列（GenBank 登录 号：EU262719），分析发现含有9个与根特异表达相关的顺式作用元件ROOTMOTIFTAPOX1。转基因拟南芥的组织化 学染色分析表明，GUS 基因主要在拟南芥的根部特异表达。【结论】克隆获得了番茄 LeGRP2 基因启动子，该启动 子主要在转基因拟南芥根部表达GUS基因，具有较强的根表达特异性。 关键词：番茄；根特异启动子；基因组步移；组织表达特异性 Cloning of LeGRP2 Promoter from Tomato that Shows Root-Specific Expression in Arabidopsis 1 1 1,2 1 1 1 LI Zhi-miao , YANG Yue-jian , YANG Fei , YE Qing-jing , WANG Rong-qing , RUAN Mei-ying , 1 1 3 ZHOU Guo-zhi , YAO Zhu-ping , Yong-Ling Ruan 1 ( Institute of Vegetables, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences/China-Australia Research Center for Crop Improvement, Hangzhou 310021, China ; 2College of Chemistry and Life Science, Zh