染色体与DNA遗传的物质基础PPT.ppt

(三）DNA连接酶：连接DNA双链中的单链切口 作用特点： 大肠杆菌和其它细菌的DNA连接酶要求NAD+提供能量；在高等生物和噬菌体中，则要求ATP提供能量。T4噬菌体的DNA连接酶不仅能连接双链DNA上的粘性切口，而且能连接无粘性末端的平头双链DNA。 DNA连接酶在DNA复制、损伤修复、重组等过程中起重要作用。 DNA连接酶作用机理 (四)与DNA合成有关的其它蛋白因子(大肠杆菌中) 蛋白质 功能 相对分子量（×103） 分子/细胞 DNA旋转酶（或拓扑异构酶） DNA解链酶 单链结合蛋白 引物合成酶 DNA聚合酶Ⅰ 引入或松开超螺旋 使双链DNA 解链 稳定单链区 合成RNA引物 除去引物并填满缺口 400 65 74 60 109 50 300 100 300 1、拓扑异构酶 拓扑异构酶：催化DNA的拓扑连环数发生变化的酶，在DNA重组修复和其它转变方面起重要作用。 除连环数不同外其它性质均相同的DNA分子称为拓扑异构体，引起拓扑异构体反应的酶称为拓扑异构酶。 第三章 DNA的复制与损伤修复Replication and Repair of DNA 本章主要内容 一、DNA的半保留复制 二、DNA复制的起点与方向 三、DNA的半不连续复制 四、与DNA 复制有关的蛋白质 五、大肠杆菌DNA的复制过程 六、复制起始的时序控制 七、真核生物DNA复制特点 八、DNA损伤的修复 目的要求 1. 掌握遗传信息传递的中心法则。 2.? 掌握DNA复制的一般规律：DNA的半保留复制、 DNA的半不连续复制的概念。 3.? 了解三种大肠杆菌DNA聚合酶的催化特性及其功 用；了解原核生物DNA的复制过程。 4.? 了解使DNA损伤的因素；DNA损伤的修复机制： 错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、直接修 复、重组修复及倾向差错的修复的过程及过程所需要 的酶类；了解DNA损伤修复的意义。 目的要求 1964-1970 发现劳氏肉瘤病毒的遗传信息传递方式：逆转录 1953年，Watson和Crick提出中心法则：遗传信息的单向流动。 中心法则： 病毒（复制） 复制 转录 DNA RNA 蛋白质 翻译 逆转录 RNA的复制存在于RNA病毒 DNA是生物遗传的主要物质基础，生物机体的遗传信息以密码的形式编码在DNA分子上，表现为特定的核苷酸排列顺序，并通过DNA的复制由亲代传递给子代。在后代的生长发育过程中，遗传信息自DNA转录给RNA,然后翻译成特异的蛋白质，以执行各种生命功能，使后代表现出与亲代相似的遗传性状。 复制：以亲代DNA或RNA为模板，根据碱基配对的原则，在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 几个基本概念： 逆转录：以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，生成DNA的过程。 翻译：亦叫转译，以mRNA为模板，将mRNA的密码解读成蛋白质的氨基酸顺序的过程。 转录：以DNA为模板，按照碱基配对原则合成RNA，即将DNA所含的遗传信息传给RNA，形成一条与DNA链互补的RNA的过程。 Reverse transcription 中心法则图示 一、DNA的半保留复制 2.半保留复制的实验证据: 1.定义： 1958年Meselson和Stahl用同位素15N标记大肠杆菌DNA,首先证明了DNA的半保留复制。 以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。 DNA复制的可能方式 全保留与全新复制 分散复制 半保留复制 DNA半保留复制图示： 半保留复制的证明： Meselson 和Stahl将同位素15N标记的15NH4Cl加入大肠杆菌的培养基中培养12代，使大肠杆菌的DNA都带上15N的标记，然后将该大肠杆菌转入14N的普通培养基中培养后，分离子一代、子二代、子三代、子四代DNA，进行氯化铯密度梯度离心，实验证明了DNA的半保留复制。 15N-DNA的密度大于14N-DNA的密度 亲代DNA（15N～15N） 子一代DNA（15N～14N） 子二代DNA (15N～14N，14N～14N 1:1) 子三代DNA (15N～14N，14N～14N 1:3) 子四代DNA (15N～14N，14N～14N 1:7 ) 亲代DNA与子二代DNA的混合物