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粗毛栓菌漆酶酶谱的分析 [答辩相关表格]
XXX
本科毕业设计(论文)答辩表
论文题目: 粗毛栓菌漆酶的酶谱分析
生命科学系 系 生物工程 专业 06 级 本科一班
学 号 XXX
姓 名 XXX
指导教师 XXX
评阅成绩
答辩委员会主席
答辩委员会委员
答辩成绩
XXX教务处印制
2010 年 06 月 02日
XXX本科毕业设计(论文)答辩记录表
答辩时间:2010年 06月02 日 记录人签字: 问1:为什么在你的研究中5%的凝胶不如7.5%的效果好?
答:因为本实验在采用圆盘电泳时,浓度为5%的胶液在玻璃管中不易聚合,其原因尚待分析。改用7.5的胶后,聚合效果较好。在7.5%的凝胶中显示4条带,说明着4中漆酶的同工酶等电点差异较大
问2:等电聚焦中有哪些因素影响漆酶酶谱的分辨率?
答: 1、两性电解质的pH范围 因为两性电解质pH范围类型不同,有广谱和窄谱之分,窄谱pH范围相对较小,分辨率相对较高,广谱pH范围较大,误差也很大故分辨率较小。一般先用广谱两性电解质做IEF分析确定同工酶等电点区间
然后再改用窄谱两性电解质,进一步测定各同工酶的等电点。
2、电泳方式 使用的是圆盘电泳还是平板电泳,现在市场上有预制胶出售,其型号种类多样客户可根据需要选购。
3、玻璃管长度 玻璃管较长则容易区分pI相近的蛋白质,使分辨率提高。
4、凝胶的浓度 浓度太大会则胶颗粒间隙小则阻力大影响蛋白样品的迁移,浓度太小凝胶不易聚合。 论文答辩评语:
该生介绍了论文的主要目的、内容与结果,能够正确回答有关提问。该生具备了一定的独立从事科学研究的能力。该论文达到了学士学位论文的要求。 答辩委员会主席签名:
XXX本科生毕业设计(论文)任务书
设计(论文)题目 粗毛栓菌漆酶的酶谱分析
系、专业 生命科学系生物工程专业 学生姓名 XXX 学 号 XXX
指导教师姓名 XXX 指导教师职称 教授 开题日期 2010年03月10日
设计(论文)的主要内容(技术指标)与要求:
主要内容(技术指标):
本文主要测定了粗毛栓菌在一种以麦草粉为诱导物的培养液中的产漆酶情况,采用等电聚焦研究漆酶酶谱。
要求:
通过本实验掌握一些基本的实验操作技能及查阅文献的几种基本方法,并形成了严谨的实验作风。
进度安排:
1、2010.4.10-4.19菌种培养。
2、2010.4.19-4.19对粗酶离心。
3、2010.4.19-4.20对粗菌液盐析、除去盐离子。
4、2010.4.20-4.21透析:除去其他大分子物质。
5、2010.4.21-4.22对提取的粗酶进行超滤浓缩。
6、2010.4.22-4.23圆盘电泳等电聚焦测漆酶酶谱。
系意见:
注:1. 任务书由指导老师填写. 2. 任务书必须在第七学期第13周前下达给学生.
XXX本科生毕业设计开题报告
毕业论文题目 粗毛栓菌漆酶的酶谱分析 题目类型 实验 题目来源 指导教师拟定 院(系) 生命科学系 专 业 生物工程 指导教师 XXX 职 称 教授 姓 名 XXX 年 级 06级 学 号 XXX 一、立题依据(国内外研究进展或选题背景、研究意义等)
漆酶(Laccase, EC 1.10.3.2)是一种含铜离子的多酚氧化酶,最早发现于日本紫胶漆树
Rhus vernicifera 的浸出液中,现已证实一些高等真菌(主要是白腐真菌)也能分泌漆酶。白腐真菌是生物圈中木质素、纤维素和半纤维素的重要降解者,其分泌的漆酶在木质素降解过程中起着重要作用。漆酶可与多种底物作用,在有机合成、生物检测、免疫检测、有毒化合物的消除、生物传感器制作、制浆造纸废水处理、纸浆生物漂白和饮料加工、食药用菌生产、食品分子交联、植物食品保护等方面具有广阔的应用前景和潜在应用价值。多年来,已对漆酶及其产生菌进行了广泛研究,内容涉及菌株生长特性、漆酶的合成调控、酶的分离纯化和酶学性质等多个方面。现已有近百种不同来源的漆酶被分离纯化并进行了酶学性质研究,一些漆酶基因已被克隆测序,有的还在酵母等真核生物内实现异源表达,但选育新的漆酶产生菌,优化其产酶条件仍是提高漆酶产量的一条重要途径和今后一段时期内研究的热点。
本研究所用粗毛栓菌Trametes gallica 是一种能够分泌漆酶的白腐真菌,可降解麦草木质纤维素。 二、研究的主要内容及预期目标
主
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