邻菲罗啉分光光度法测定铁一.ppt

* 邻菲罗啉分光光度法测定铁 （一） 陈睿婷 E-mail:ruiting_chen@163.com 仪器分析实验 紫外-可见分光光度法 紫外-可见分光光度法是研究物质分子在紫外-可见光区分子吸收光谱的分析方法。 入射光I0 透射光It 吸光度： 单光束紫外可见分光光度计主要部件 原理：由光源发出的连续光谱，进入单色器经色散元件分光，获得的单色光分别通过参比溶液和样品溶液，进行光强度（吸收）的测定。 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 （一）、掌握分光光度法测定铁的原理及方法 （二）、通过测定铁的条件试验，掌握分光光度法测定铁的条件及方案的拟定。 （三）、掌握分光光度计的组成部分，操作注意事项和如何使用它实现对物质的检测。 （四）、掌握7200型分光光度计的使用方法。 一、实验目的 Lamber-Beer定律 Lambert-Beer定律是说明物质对单色光的吸光度（A）与吸光物质的浓度（c）和 液层厚度（l）间的关系的定律，是光吸收的基本定律，是紫外-可见光度法定量的基础。 Sample (conc. C) Path length l 入射光 I0 透射光 It A＝ Ecl 浓度 （比尔定律） 厚度 (朗伯定律） 吸光系数 吸光度 二、实验原理 在pH=2～9的条件下，Fe2+与邻菲罗啉（邻二氮菲）生成很稳定的橙红色的络合物，其反应如下： 此络合物的logK稳=21.3，ε=11000。 显色反应：使得无色物质通过反应生成有色物质，提高测定灵敏度和选择性。 邻菲罗啉-Fe2+配合物的紫外吸收光谱 510nm 青绿色 橙红色 4Fe3++2NH2OH·HCl═4Fe2++N2↑ +H2O+4H+ +2Cl- 在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+： 测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。通常在pH值~5的缓冲液介质中测定。 本试验中用HAc-NaAc缓冲溶液 三、仪器和试剂 7200型可见分光光度计、pHS-3B型酸度计 仪器： 铁标准溶液（CFe3+=10?g/ml） 10%盐酸羟胺水溶液 0.1％邻菲罗啉水溶液 1mol/L NaAc缓冲溶液 C(HCl)=0.1mol/L溶液 C(NaOH)=0.4mol/L溶液 试剂： 四、实验步骤 （一）条件试验 1、测定波长选择：吸收曲线(A-l曲线)的绘制，选择最大吸收波长作为测定波长； 2、反应时间选择：邻菲罗啉铁配合物的稳定性，绘制A-t曲线； 3、显色剂用量：显色剂浓度的影响，绘制A-V曲线； 4、pH选择：溶液酸度对配合物的影响，绘制A-pH曲线。 1、吸收曲线的绘制 试样配制： 5mL 5mL 1mL 5.00mL 试液 5mL 5mL 1mL 0.00mL 参比溶液 邻菲罗啉 0.1% NaAc缓冲液 1mol/L 盐酸羟胺 10% 铁标液 CFe3+=10μg/mL 吸收曲线（A-λ） 吸光度A 570 560 550 540 530 520 波长λ(nm) 吸光度A 510 500 490 480 470 460 450 波长λ(nm) 用蒸馏水定容至50mL 静置10分钟，测试 2、邻菲罗啉配合物的稳定性 试样配制：与实验1一样，可共用。 5mL 5mL 1mL 5.00mL 试液 5mL 5mL 1mL 0.00mL 参比溶液 邻菲罗啉 0.1% NaAc缓冲液 1mol/L 盐酸羟胺 10% 铁标液 CFe3+=10μg/mL 曲线（A-t）： 吸光度A 90 60 30 15 5 时间t (min) 检测波长：510nm 用蒸馏水定容至50mL 0 2 4 6 10 15 45 60 3、显色剂浓度影响 试样配制： x mL 5mL 1mL 10.00mL 试液 邻菲罗啉 0.1% NaAc缓冲液 1mol/L 盐酸羟胺 10% 铁标液 CFe3+=10μg/mL 曲线（c-A） 1.00mL 3.00mL 5.00mL 吸光度A 10.00mL 0.50mL 0.30mL 0.10mL 邻菲罗啉0.1% 参比：蒸馏水；检测波长：510nm 静置10分钟，测试 用蒸馏水定容至50mL 4、溶液酸度对配合物的影响 试样配制： pH值 5mL 5mL 0.4mol/L NaOH 2mL 10.00mL 1 5mL 5mL 0.1mol/L HCl 2mL 10.00mL 2 5mL 邻菲罗啉 0.1% 5mL NaAc 缓冲 2mL 10.00mL 3 吸光度 pH调节 溶液 盐酸羟胺 10% 铁标液 10μg