生殖毒性评价.pptVIP

生殖毒性的评价方法 艾宝民 目的和意义： 1、评价化学物对亲代生殖系统和子代安全性 2、生殖毒性化学物的管理和中毒预防 3、优生优育 提高人口素质 生殖毒性评价需四方面资料 1、动物毒性试验 2、控制下的临床研究 3、环境流行病学资料 4 体外试验 一 动物试验 分为四个部分： 一般生殖毒性试验 致畸试验 围产期毒性试验 繁殖实验 ‘ （一）一般生殖毒性试验 目的：评价化学毒物对生殖细胞（雌、雄）、胚胎、胎儿的影响 （以下引自新药临床前研究指导原则汇编——药学、药理学、毒理学） 动物：多用大鼠，雌、雄各20只 如必要可用家兔，避孕药还需用猴子试验。 剂量与给药途径：根据亚急性毒性试验结果和毒代动力学试验数据设定 至少两个剂量组，高剂量组可产生轻微毒性反应，给药途径原则上与临床拟用途径同。 给药时间：交配前，雄 60—80 天，雌 14 天，连续给药。雌动物交配后继续给药至多数器官形成期。 大鼠器官形成期一般为：6-15d 对照：阴性（溶剂）对照，也可设阳性对照 观察指标与报告：动物一般状况、体重变化、受孕率、死胎数、活胎数、活胎重量、外观和内脏及骨骼变化，必要时做组织学检查，统计处理，结果综合分析 给药途径：药物拟用给药途径或灌胃、自由摄取，但不宜用腹腔注射。 给药时间：于胚胎器官形成期连续给药。 大鼠：孕后6-15天 小鼠：孕后6-15天 家兔：孕后6-18天 对照：必须设溶剂对照，必要时设阳性对照。可供选择的阳性对照物有敌枯双（0.5-1.0mg/kg体重），五氯酚纳（30 mg/kg /体重）阿斯匹林（250-300 mg/kg ）及维生素A(25 000-40 000IU)等. 观察与检查：妊娠零天（判定方法）开始，记录实验动物症状、体重（0、3、7、10、16、20d）；20天处死，记录孕鼠重、黄体数、死胎数、（着床数、吸收胎、早期死胎、晚期死胎）、活胎数、活胎重、外观异常等；一半胎鼠用Bouin氏液固定做内脏检查，一半茜素红染色做骨骼畸形检查。 报告：将以上数据整理成表，并计算各种畸形率，骨骼还要分析骨化程度 判定：各项数据经统计处理后判定胚胎毒性和致畸潜力。 LD50 致畸指数= 最小致畸剂量 用来评价致畸强度，10以下为不致畸，10-100为致畸，100以上为强致畸 注意事项： 1、该试验不能肯定或排除由于两性配子损伤所引起的畸形和胚胎毒性 2、给药剂量、时间、途径、动物敏感性对实验结果有明显影响 见图 3、阴性（溶剂）对照也会有个别畸形或/和变异 4 某些畸形或变异如多肋、短尾不影响后代存活和健康；某些部位或器官的骨化迟缓，如胸骨、脊椎骨、趾骨、枕骨，可在出生后赶上正常动物，属于胚胎毒性而非畸形。 5、变异与畸形的内在联系 （三）围产期毒性实验 目的：评价化学物于孕后期至断乳期之间对孕鼠/哺乳鼠和胎儿/新生仔的潜在不良影响 动物：通常用小鼠、大鼠或家兔，每组孕鼠15-20只，家兔8-12只 剂量与给药途径：与一般生殖毒性试验同 给药时间：大、小鼠于妊娠第15天开始给药，至分娩后21天（小鼠）和28天（大鼠），家兔于妊娠后22天开始给药，至分娩后31天。 对照：阴性（溶剂）对照，也可设阳性对照 观察与报告：观察动物一般状况，记录胎仔数、一般发育状况和外观畸形等。取一定数量幼仔配对饲养，继续观察其存活、生长发育，包括行为、生殖功能及其它异常症状，必要时可队F1代动物进行运动和学习能力的测定等。 根据上述资料的统计分析结果结合病理组织学检查，对围产期给药的毒性及程度做出综合评价 （四）繁殖试验（reproduction studies） 又称多代繁殖试验（multigeneration reproduction studies） 目的：评