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大肠杆菌多重耐药调控基因marR的克隆及其原核表达.pdfVIP

大肠杆菌多重耐药调控基因marR的克隆及其原核表达.pdf

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大肠杆菌多重耐药调控基因marR的克隆及其原核表达

《 》 20 10 7 ( )17 黑龙江畜牧兽医 科技版 年 月 上 大肠杆菌多重耐药调控基因marR 的克隆 及其原核表达 , , , 许 皓 马红霞 马 颖 林雁春 ( , 130 118) 吉林农业大学动物科技学院 吉林长春 中图分类号:S855 . 1 文献标识码:A 文章编号:1004 7034 (20 10)07 - 00 17 - 03 : ;marR ; ; 关键词 大肠杆菌 克隆 原核表达 : MarR , ATCC25922 , GenBank 摘 要 为获得 多克隆抗体 试验以大肠杆菌 基因组为模板 根据 中大肠 marR ,PCR 435 bp marR , pMD18 - 杆菌的 基因序列设计引物 扩增出长约 的 基因片段 将所得片段与 T , JM109 , , GenBank 载体连接 转化至 大肠杆菌中 筛选阳性克隆 其质粒中插入序列的测序结果与 中 , , BamH Xho 435 bp , 报道一致 从阳性克隆中提取质粒 经 Ⅰ和 Ⅰ酶切回收 的目的片段 定向克隆到 pET - 28a (+ ) , BL21 (DE3) 。 : 表达载体中 提取阳性质粒转化到大肠杆菌 中获得阳性克隆 结果表明 IPTG , SDS - PAGE marR ; Western - blot 经 诱导阳性菌收集表达产物 通过 分析证实 基因得到表达 经 检测该蛋白具有良好的反应原性。 Cloning and prokaryotic expression of multi - drug resistant regulator marR gene of Escherichia coli XU Hao ,MA Hong - xia ,MA Ying ,LIN Yan - chun (College of Animal Science and Technology ,Jilin Agricutural University ,Ch

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