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- 2018-01-26 发布于天津
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生物工程学报动物及兽医生物技术牛朊蛋白基因敲除载体的构建及真核细胞转染张海林程胖兰杰宋永利张涌西北农林科技大学动物医学院农业部动物生殖生理与胚胎工程重点实验室杨凌摘要利用正负筛选策略对中靶细胞进行富集是提高体细胞基因打靶效率常用的策略之一将动物的朊蛋白基因敲除使其不能表达朊蛋白传染性海绵状脑病的致病蛋白从而使其具有抵抗病感染的能力本研究采用正负筛选策略构建了牛基因的双等位基因敲除载体经内切酶线性化后再通过电穿孔转染牛胎儿成纤维细胞分别用进行正负药物筛选最终获得了个药物抗性细胞克隆进一步采用测序间
生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2010, March 25; 26(3): 297−304
Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061
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