以苯丙氨酰-trna合成酶为靶点的新型抗结核.pdfVIP

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以苯丙氨酰-trna合成酶为靶点的新型抗结核

微生物学通报 OCT 20, 2012, 39(10): 14371446 Microbiology China © 20 12 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 以苯丙氨酰-tRNA 合成酶为靶点的新型抗结核 药物高通量筛选模型的建立和应用 张志明 孙莹 赵莉莉 王莉宁 魏玉珍 苏静 张玉琴 余利岩* ( 100050) 摘 要: 【目的】建立结核分枝杆菌 PheRS 抑制剂高通量模型, 并运用此模型筛选化合 物和发酵液样品。【方法】克隆和表达结核分枝杆菌PheRS 蛋白并优化其酶活测定方法, 在 此基础上建立结核分枝杆菌 PheRS 抑制剂高通量筛选模型, 并通过耻垢分枝杆菌作为检 定菌对筛选到的样品进行抗菌活性测定及细胞毒性评价。【结果】运用此模型筛选了化合 物样品 11 600 个, 发酵液样品 5 200 个, 筛选得到阳性化合物9 个, 阳性发酵液37 个。而 后通过耻垢分枝杆菌作为检定菌的抗菌活性测定及细胞毒性评价后, 得到了 6 个发酵液 阳性样品。【结论】建立的 PheRS 抑制剂模型可成功用于化合物和微生物发酵液的高效 筛选, 得到的 6 个发酵液阳性样品在酶水平和抗分枝杆菌方面均具有良好活性且毒性较 低, 值得进一步研究。 关键词: 苯丙酰氨-tRNA 合成酶, 靶点, 高通量模型, 结核分枝杆菌 The establishment and application of a high throughput screening assay for inhibitors of Mycobacterium tuberculosis Phenylalanyl-tRNA synthetase ZHANG Zhi-Ming SUN Ying ZHAO Li-Li WANG Li-Ning WEI Yu-Zhen * SU Jing ZHANG Yu-Qin YU Li-Yan (Institute of Medicin al Biotechnology, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100050, China) Abstract: [Objective] To establish a high-throughput drug screening model for screening in- 基金项目: (No.; (No. NIMR-2011-3); “ ” (No. 2009ZX09301-003); (No. 201002021) *通讯作者:Tel: 86- 10 : yuliyan_2000@ 收稿日期:2012-01-05; 接受日期:2012-04- 17 1438 微生物学通报

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