当归饮片蛋白质的提取与活性分析Extractionandactivity-广西植物.PDFVIP

ｈｔｔｐ:/ / ｊｏｕｒｎａｌ.ｇｘｚｗ.ｇｘｉｂ.ｃｎ － 　 Ｇｕｉｈａｉａ　 Ｎｏｖ. ２０１６ꎬ３６(１１):１３６３ １３６８ － ｈｔｔｐ:/ / ｗｗｗ.ｇｕｉｈａｉａ ｊｏｕｒｎａｌ.ｃｏｍ ＤＯＩ:１０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１５１２０２８ － 潘剑茹ꎬ张小梅ꎬ李玲玲ꎬ等. 当归饮片蛋白质的提取与活性分析 [Ｊ]. 广西植物ꎬ２０１６ꎬ３６(１１):１３６３ １３６８ ＰＡＮＪＲꎬＺＨＡＮＧＸＭꎬＬＩ ＬＬꎬｅｔ ａｌ. Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｐｉｅｃｅｓ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｎｇｅｌｉｃａ [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ２０１６ꎬ － ３６(１１):１３６３ １３６８ 当归饮片蛋白质的提取与活性分析 ∗ 潘剑茹 ꎬ张小梅ꎬ李玲玲ꎬ王香玲ꎬ吴伦巧ꎬ 陈莉娟ꎬ李　 娴 ( 福州大学 生物科学与工程学院ꎬ福州 ３５０１０８ ) 摘　 要:当归是传统的补血中药ꎬ其所含的多糖与小分子已有大量的研究ꎬ然而当归中的蛋白质组成与功效 ￣１ ＝ 仍无人知晓ꎮ 该研究通过０.０５ ｍｏｌ Ｌ Ｔｒｉｓ￣ＨＣｌ(ｐＨ ８.０)缓冲液浸提和组织匀浆得到当归饮片粗提液ꎬ结合 硫酸铵沉淀和透析法去除粗提液中的多糖及还原糖等小分子成分ꎬ得到当归饮片总蛋白质ꎬ并首次对其组成 和生物活性进行了研究ꎮ 结果表明:当归饮片蛋白含量较高ꎬ分子量为 １７.５~９０.７ ｋＤａꎬ其中 １７.５ ｋＤａ 的蛋白 含量最高ꎬ达４７％ꎮ 饮片蛋白在ｐＨ５~１１范围内较为稳定ꎬｐＨ为３时ꎬ仅余少量 １７.５ ｋＤａ 的蛋白ꎮ 当归饮片 蛋白质中至少有３种蛋白在８０ ℃内稳定存在ꎬ其中热稳定性最好的是 １７.５ ｋＤａ 的蛋白ꎬ在热处理温度达到 １００ ℃时ꎬ仍然稳定存在ꎬ但随着处理时间的延长ꎬ该蛋白有部分单体发生了交联反应ꎮ 当归饮片蛋白质具有 清除ＤＰＰＨ 自由基的能力ꎬ且该能力随着热处理温度及热处理时间的增加而增加ꎬｐＨ处理会影响该能力ꎬｐＨ 为５.０时ꎬ清除能力最高ꎬ５.０两侧清除能力均下降ꎮ 此外ꎬ当归饮片蛋白质对细胞有很强的选择性ꎬ表现为对 ￣１ 正常肝细胞Ｌ￣０２有显著的增殖作用(１.０~４.０ｍｇ ｍＬ ꎬＰ０.０１)ꎬ对白血病细胞Ｋ５６２则表现出显著的抑制作 ￣１ ￣１ 用(０.５~１.５ ｍｇ ｍＬ ꎬＰ０.０１)ꎬ当归饮片蛋白浓度为 １.０ ｍｇ ｍＬ 时ꎬ可使 Ｌ￣０２ 细胞增值率达５５０％ (Ｐ ０.０１)ꎬ而Ｋ５６２细胞的抑制率达 １８.３％ (Ｐ０.０１)ꎮ 综上所述ꎬ当归饮片饮片蛋白具有重要的生物活性ꎬ可望 从中开发出具有保肝作用的药物蛋白ꎮ 关键词:当归饮片ꎬ蛋白质ꎬ稳定性ꎬＤＰＰＨ 自由基ꎬ细胞增殖 中图分类号:Ｑ９４６ꎬＲ２８４.２　 　 文献标识码:Ａ　 　 文章编号:１０００￣３１