高效液相色谱法检查龙血竭中非法添加的染色剂苏丹红.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法检查龙血竭中非法添加的染色剂苏丹红 余爱红（湖北省黄冈市黄州区人民医院 湖北黄冈 438000） 【摘要】目的 探索龙血竭中非法添加苏丹红的检测方法。方法 采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈－水（95∶5）为流动相，检测波长为520 nm，记录色谱峰，并用二极管阵列检测器进行纯度检测。结果 样品在与苏丹红Ⅰ、Ⅳ对照试剂相应保留时间处有吸收峰，且紫外吸收光谱一致。结论 本法操作简便、分离度符合要求、重现性强，可作为龙血竭的质量控制手段。 【关键词】龙血竭 苏丹红 薄层色谱 HPLC 【中图分类号】R927 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）01-0249-02 苏丹红是一类人工合成的化工染色剂，被大量地应用在生物、化学等领域。随着人们对苏丹红结构及致毒性的逐步了解，国际癌症研究机构（I A R C）将苏丹红归为第3类可致癌物质。有报道在血竭中检出了苏丹红Ⅳ[1]，而在龙血竭中尚未见非法添加苏丹红染色，并进行系统研究的报道。龙血竭为百合科植物剑叶龙血树Dranaena cochinchinensis(Lour.)S.C.Chen的树脂[2]，作为进口血竭的替代品，亦称为国产血竭，在治疗跌打损伤方面有着广泛的应用。不法分子利用苏丹红染色制假造假，有较大的危害性，本试验研究了其高效液相色谱检测方法。 1.实验材料 1.1 试剂及仪器：DIONEX高效液相色谱仪，P680泵， PDA-100检测器，Waters 4.6times;250 mm C18柱，TCC-100柱温箱， Sartrius CP225D电子天平，超声波震荡仪300W25Khz。 1.2 供试品：供试品①：标示生产企业－西双版纳柬龙制药厂，110309；供试品②：标示生产企业－中国医学科学院版纳华胜制药厂，080613；供试品③：标示生产企业－中国医学科学院版纳名盛制药厂，0108.20。 1.3 对照试剂：苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，上海雅吉科技生物有限公司提供。乙腈为色谱纯，水为纯化水，其它试剂均为分析纯。 2.方法及结果 2.1 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－水（95∶5）为流动相[1]；流速：1.0 ml/min；二极管阵列检测器，检测波长为520nm。理论板数苏丹红Ⅰ峰为17301。 2.2 对照试剂溶液的制备：取苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对照试剂适量，分别加乙醇制成每1ml含50ug的溶液，即得。 2.3 供试品溶液的制备：取本品粉末0.05g，加乙醇25m l，超声处理15分钟，滤过。 2.4 测定法：分别精密吸取对照试剂溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪测定，记录色谱图和紫外光谱图。 2.5 试验结果：高效液相色谱图中供试品③在与苏丹红Ⅰ、Ⅳ对照试剂相应保留时间处有吸收峰，供试品①、②为正品无相应吸收峰。图谱如下： 图1 图2 图3 2.6 专属性的考察：本实验中供试品①、②为正品龙血竭，其高效液相色谱图中不显与苏丹红对照试剂及供试品相同的色谱峰，见上图一、二、三。 2.7 检测限的考察：在以上条件下以信噪比为3∶1时的进样量作为最低检出限，结果表明：其检测限为 0.8ng。 3.讨论 苏丹红在甲醇、乙醇、三氯甲烷、石油醚中溶解，在水中不溶，其提取方法有用乙腈的，也有用正己烷的， 都有较大的毒性。本实验采用乙醇超声提取，安全无毒，且能够得到较理想的图谱。 影响苏丹红检测的主要是流动相的组成，本试验曾采用乙腈-乙酸-水、乙腈-水、甲醇-水、甲醇-甲酸-水等流动相，结果证实用乙腈-水为流动相有较好的效果，经等度洗脱，不需要切换即可在520 nm波长下获得较理想的图谱，各峰分离度好，回收率98%。建议将此方法应用到龙血竭胶囊等含龙血竭的中成药以及树脂类药材中，以控制药品质量，避免因此而造成公共安全事件。 参考文献 [1] 苏晶，程显隆等. 伪品血竭中染色剂苏丹红IV的检测[J].中国药事，2008，22（4）：318-320. [2] 卫生部新药转正标准第22册，1999：651. [3] 全国标准化委员会．GB／T19681—2005食品中苏丹红染料的检测方法[S]．北京：中国标准出版社，2005.