高效液相色谱法测定喘嗽宁片中苦杏仁苷含量.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法测定喘嗽宁片中苦杏仁苷含量 吴朦俊 肖英 　　（贵州省毕节市食品药品检验所 贵州 毕节 551700） 　　【摘要】 目的：建立测定喘嗽宁片中苦杏仁苷含量的高效液相色谱法。方法：用Diamonsil C18（5mu;m，200times;4.6mm）色谱柱，流动相为甲醇-水（20:80），检测波长为218nm，流速1.0mL/min。结果：苦杏仁苷进样量在0.06016～0.96256mu;g(r=1.0000)范围内与峰面积积分值具有良好线性关系,平均回收率为99.1%，RSD为1.2%（n=6）。结论：该方法专属性强、灵敏、操作简便，可用于喘嗽宁片中苦杏仁苷的含量测定。 　　【关键词】喘嗽宁片；苦杏仁苷；高效液相色谱法；含量测定 　　【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）19-0377-02 　　喘嗽宁片[1]由白果100g、苦杏仁160g、地龙160g、桑白皮160g、陈皮160g、黄芩160g、白前160g、苦参160g、甘草160g、茯苓270g等组成，具有清热平喘，止咳化痰的功效，用于支气管哮喘，喘息型支气管炎，肺气肿，肺心病早期。原质量标准[1]中，对主药苦杏仁既无定性也无定量分析。为确保该制剂的疗效，更好地控制其质量，本试验以高效液相色谱法（HPLC）测定苦杏仁的有效成分苦杏仁苷的含量，现报道如下。 　　1.仪器与试药 　　1.1 仪器 　　Agilent 1260型高效液相色谱仪（四元泵、柱温箱、DAD二极管阵列检测器、自动进样器）及色谱数据工作站；AY120型电子天平（SHIMADZU，感量0.1mg)；MSE3.6p-0CE-DM型电子天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司，感量0.001mg]；洁康PS-100超声波清洗器。 　　1.2 试药 　　苦杏仁苷对照品（中国食品药品检定研究院,批号: 110820-201305，含量：85.8%）；喘嗽宁片同一生产厂家3个批号：120904、130601、130602；甲醇为色谱纯, 水为重蒸馏水；其余试剂为分析纯。 　　2.方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　Diamonsil C18（5mu;m，200times;4.6mm）色谱柱。流动相：甲醇-水（20∶80）；检测波长：218nm；流速为1.0mL/min；进样量：10mu;L；柱温30℃。 　　2.2 对照品溶液的制备 　　精密称取苦杏仁苷对照品14.608mg, 置50mL量瓶中，加甲醇约30mL，超声5分钟使溶解，冷却，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1mL含苦杏仁苷0.2507mg的溶液，作为对照品储备液。精密量取对照品储备液3mL，置25mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得每1mL含0.03008mg苦杏仁苷的对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　取本品20片，除去糖衣，精密称定，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置25mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得供试品溶液。按处方制备工艺以十分之一的处方量制得不含苦杏仁的阴性样品，同供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。 　　2.4 色谱行为与系统适应性实验 　　分别取2.2与2.3项下制备的对照品、供试品、阴性对照溶液，按照2.1项下的色谱条件进样，如图1所示，阴性对照溶液无干扰。理论板数按苦杏仁苷峰计算不低于7000[2]。 　　2.5 线性关系考察 　　分别精密吸取2.2项下对照品溶液（0.03008mg/mL）2,4,8,16,32mu;L，按2.1项下的色谱条件进样，测定苦杏仁苷峰面积，以峰面积积分值（A）作为纵坐标，以进样量（mu;g）为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为A=5.4773times;102X-1.6833，r=1.0000，结果表明苦杏仁苷进样量在0.06016～0.96256mu;g范围内与峰面积积分值具有良好线性关系。 　　2.6 稳定性实验 　　将2.3项下的供试品溶液室温放置，分别于0、2、4、6、8、10、12小时测定，记录峰面积，结果RSD为：0.5%（n=7），可见供试品溶液在室温下12小时内稳定。 　　2.7 精密度实验 　　精密量取2.2对照品溶液，按2.1色谱条件重复进样6次，记录峰面积，RSD为1.1%（n=6），表明仪器精密度良好。 　　2.8 重复性实验 　　取同一批号（130601）的样品6份，按供试品溶液制备方法及试验条件测定，结果苦杏仁苷平均含量为4.87mg/g，RSD为0.8