高效液相色谱法测定桂龙咳喘宁胶囊中芍药苷的含量 王颖.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法测定桂龙咳喘宁胶囊中芍药苷的含量 王颖 王颖（广西省柳州市柳铁中心医院药剂科 545007） 【中图分类号】R286 【文献标识码】B【文章编号】1672-5085（2013）19-0389-02 【摘要】 建立测定桂龙咳喘宁胶囊中芍药苷含量的高效液相色谱法。方法　色谱柱采用日本DL—C18柱(150mmx4.6mm，5um)，乙腈-0.1%磷酸溶液（30:70）为流动相，检测波长为230 nm。流速：1.0 mLbull;min-1；柱温：33℃；进样量：10 mu;L。结果　芍药苷在0.35～3.5ug范围内进样量与吸收面积值呈良好的线性关系（r=0.9998），平均回收率为97.6％，RSD=1.09％(n=5)。结论　高效液相色谱法简单、准确，重复性好，可用于测定桂龙咳喘宁胶囊中芍药苷含量的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法 桂龙咳喘宁胶囊 芍药苷 桂龙咳喘宁胶囊由桂枝、龙骨、白芍、生姜、大枣、炙甘草、牡蛎、黄连、法半夏、瓜蒌皮、苦杏仁（炒）组成，具有止咳化痰、降气平喘之功效。其质量标准[1]中对主药之一芍药没有给出含量测定方法，因而不能有效控制药品质量，而本文试建立测定桂龙咳喘宁胶囊中芍药苷含量的高效液相色谱法，取得良好效果，现报告如下： 1.仪器与试剂 UltiMate 3000型高效液相色谱仪(德国戴安公司)；P-100 UV检测器，岛津CISSIC工作站。芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号：0758—20015)，桂龙咳喘宁胶囊(山西桂龙医药有限公司批号20071235，甲醇为色谱纯；其他试剂均为分析纯。 2.方法与结果 2.1色谱条件： 色谱柱采用日本DL—C18柱(150mmtimes;4.6mm，5um)，乙腈-0.1%磷酸溶液（30:70）为流动相，检测波长为230nm。流速：1.0mLbull;min-1；柱温：33℃。 2.2溶液制备 对照品溶液：精密称取80℃干燥1 h的对照品35mg，置50mL量瓶中，加稀乙醇适量，振摇，使对照品溶解，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀。超声除去气泡，用稀乙醇补足至刻度，作为对照品溶液。 供试品溶液制备：称取桂龙咳喘宁胶囊内容物5mg置100mL 锥形瓶中,加入稀乙醇50mL,密塞,超声处理30min，取滤液加在已处理好的中性氧化铝柱(4g，200～300目)上洗脱，收集洗脱液50ml,用微孔滤膜(0.45mu;m) 滤过,取续滤液,即得。 阴性对照液：取缺芍药的处方药，制备不含芍药的阴性对照品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照液。 2.3干扰试验测试：分别取3种溶液10ul，注入色谱仪，记录色谱图发现阴性供试品色谱中在与对照品保留时间相应的位置无色谱峰，说明处方中其他药味对测定无干扰。 2.4线性关系：精密量取对照品溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，分别置10mL容量瓶中，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀。每个浓度点进样测定2次，各进样10ul，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标进行线性回归，结果表明，峰面积与进样量呈良好线性关系，回归方程为：Y=3.260times;106X-4.412times;103，r=0.9998。线性范围为0.35-3.5mu;gbull;mL-1。 2.5回收率试验：取已知含量的供试品5份，加入对照品适量，按供试品溶液制备方法制备溶液，进行含量测定，求得平均回收率为97.6%。RSD=1.09%。见表1 表1 芍药苷加样回收率试验 2.6精密度检测：对同一对照品溶液连续进样5次测定，每次10uL。测定结果的RSD=1.16％(n=5)。结果表明：仪器精密性良好。 2.7重复性检测：取同一样品5份，按供试品溶液制备方法制备溶液并测定峰面积。RSD=1.09%（n=5），重复性良好。 2.8稳定性测试：取同一批样品溶液，分别在0、2、4，6，8，12h分别进样，测定含量，结果芍药苷含量的RSD为1.29％(n=6)，表明本法12h内稳定。 2.9样品的测定，分别精确吸取3批样品10ul，通过高效液相色谱仪，测定峰面积。按外标法计算含量。结果见表2 表2 3批样品测定结果（n=5） 3.讨论 本实验结合文献[2]介绍的多种流动相，比较了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-磷酸-水、甲醇-醋酸-水、乙腈-醋酸-水