高效液相色谱法测定富马酸卢帕他定中有关物质.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法测定富马酸卢帕他定中有关物质 陈精慧 张文峰 张 燕（海南新世通制药有限公司 海南海口 570216） 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)30-0080-02 【摘要】 目的 建立反相高效液相法测定富马酸卢帕他定中有关物质。方法 采用C18色谱柱，以0.0046mol/L庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠1.01g，加水适量使溶解，加冰醋酸20ml，加二乙胺20ml，再加水稀释至1000ml,用冰醋酸调节pH值至4.5，摇匀，即可)-甲醇（20∶80）为流动相；检测波长为217nm，流速为1.0mlmiddot;min-1。结果 高效液相色谱法测定富马酸卢帕他定中有关物质，降解产物和主峰达到有效分离。结论 该方法适用于测定富马酸卢帕他定原料药中有关物质的测定，方法简便，结果准确，专属性强。 【关键词】 反相高效液相法 富马酸卢帕他定 有关物质 富马酸卢帕他定是具有组胺和血小板活化因子双重阻滞作用的抗过敏药。有关富马酸卢帕他定的有关物质测定方法，作者尚未见文献报道。参照氯酚伪麻缓释片中氯雷他定的HPLC分析研究的文献，研究建立了反相高效液相法测定富马酸卢帕他定中有关物质，方法简便，专属性强，结果准确可靠。 1 仪器和试药 岛津LC-10A高效液相色谱仪。富马酸卢帕他定原料药（海南新世通制药有限公司生产）；甲醇为色谱纯。 2 方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱：C18；流动相：0.0046mol/L庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠1.01g,加水适量使溶解,加冰醋酸20ml,加二乙胺20ml,再加水稀释至1000ml,用冰醋酸调节pH值至4.5,摇匀,即可)-甲醇（20∶80）；流速：1.0mlmiddot;min-1；检测波长：217nm；进样量：20mu;l。 2.2 检测波长的选择 取富马酸卢帕他定和富马酸、中间体Ⅰ、中间体Ⅱ、中间体Ⅲ，分别加流动相溶解并稀释制成每1ml中含10mu;g的溶液，各用流动相调零后，均在200～400nm波长范围内扫描。试验结果为：富马酸卢帕他定在217nm的波长处有最大吸收；中间体Ⅰ在215nm、247nm的波长处有最大吸收；中间体Ⅱ在217nm、240.8nm的波长处有最大吸收；中间体Ⅲ在221nm、269nm的波长处有最大吸收；富马酸在220nm的波长处有最大吸收。 根据上述试验结果，富马酸卢帕他定有关物质的检测波长选择为217nm。 2.3 方法的专属性考察 2.3.1 原料与中间体的分离效能 在此色谱条件下,分别取富马酸卢帕他定原料，富马酸，中间体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ适量，加流动相制成0.3mgmiddot;min-1的溶液，作为供试品溶液，取20mu;l注入液相色谱仪，得HPLC图。试验结果表明：在本色谱条件下, 卢帕他定与主要中间体能够得到有效分离。结果见图1。 图1 富马酸卢帕他定与有关物质的分离图谱 ①富马酸 ②有关物质Ⅱ ③有关物质Ⅲ ④卢帕他定 ⑤有关物质Ⅰ 2.3.2 破环性试验 取富马酸卢帕他定5份各16mg进行以下试验： （1）加流动相溶解并稀释至50ml，作为溶液a； （2）加入1molmiddot;min-1盐酸溶液10ml，室温放置4小时，用1molmiddot;min-1氢氧化钠溶液中和后，加流动相稀释至50ml，作为溶液b； （3）加入1molmiddot;min-1氢氧化钠溶液10ml，室温放置4小时，用1molmiddot;min-1盐酸溶液中和后，加流动相稀释至50ml，作为溶液c； （4）加入30%过氧化氢溶液10ml，室温放置4小时，加流动相稀释至50ml，作为溶液d； （5）加入流动相10ml，于100℃水浴中加热60分钟，放冷后加流动相稀释至50ml，作为溶液e；分别取上述a，b，c，d，e溶液各20mu;l注入液相色谱仪，记录色谱图。结果见图2。 图2 不同条件破坏样品的色图谱 a．正常样品；b.酸破坏样品；c.碱破坏样品；d.过氧化氢破坏样品；e.高温破坏样品 结果表明，富马酸卢帕他定在强酸、强碱、氧化、高温破环条件下，有小部分降解，降解产物与主峰达到基本分离。 2.4检测限 取本品稀释成一系列浓度的溶液，进样，当峰高为噪音峰高的3～5倍时的进样量即为最低检出限，浓度为0.2mu