吐温-80对钝齿棒杆菌产L-赖氨酸的影响-食品科学.PDFVIP

※生物工程 食品科学 2016, Vol.37, No.23 173 L 吐温-80对钝齿棒杆菌产 -赖氨酸的影响 赖木兰，万 方，朱蔷云，陈雪岚* （江西师范大学生命科学学院，江西南昌 330022 ） 摘  要： -80 L - MT-M4 proB 对吐温 提高 赖氨酸产量的分子机制进行探究。以钝齿棒杆菌 Δ 为出发菌株，在菌株生 长至对数初期36 h 时，添加5 mg/mL吐温-80进行摇瓶发酵，通过反转录实时荧光定量聚合酶链式反应（reverse translate real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR ）监控相关基因的转录水平、胞内的 nicotinamide adenine dinucleotide phosphate reduced form NADPH α- 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（ ， ）水平及 酮 戊二酸脱氢酶复合物（α-oxoglutarate dehydrogenase complex，ODHC ）的活力。摇瓶发酵结果表明，添加吐温-80使 L -赖氨酸产量提高了215% ；RT-qPCR 结果表明，编码ODHC 的基因odhA 、sucB 和lpdA 、参与ODHC调控的基因 pknG dtsR ppp NADPH zwf odhA sucB lpdA 、 和 以及合成 的磷酸戊糖途径基因 的转录水平均发生了变化，其中 、 、 、 pknG dtsR1 ppp ODHC 32.9% zwf 17.6 及 基因分别发生了上调， 基因下调，相应 活力提高了 ； 基因上调了 倍，相应胞 NADPH 137% 36 h -80 ODHC 内 水平提高了 。因此，在对数生长初期 添加吐温 具有双重功效，既提高了 的表达又使 NADPH L- 积累，从而诱导 赖氨酸的高产。 -80 L- α- NADPH 关键词：钝齿棒杆菌；吐温 ； 赖氨酸； 酮戊二酸脱氢酶复合物； Effect and Molecular Mechanisms of Tween-80 on L-lysine Production in Corynebacterium crenatum