生物化学精品教学（河南科技大学）Chapter 14 DNA Replication.pptVIP

端粒酶催化作用的爬行模型 DNA聚合酶 ? ? ? ? ? ? - OH 3? - OH - OH - OH - OH 端粒 TTGGGGTT 5? 3? DNA - OH 3? G G G - OH G T - OH T - OH - OH - OH - OH G G G - OH G T - OH T - OH - OH - OH - OH G G G - OH G T - OH T - OH - OH - OH - OH G G G - OH G T - OH T - OH - OH - OH - OH G G G - OH G T - OH T 端粒酶辨认和结合母链 端粒酶催化的延长作用 –– 爬行模型 端粒 TT TTGGGGTT 5? 3? DNA T ? T G ? G G ? G G ? G G ? G 母链折叠 逆转录 - OH GGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGG T T - OH 3? 下游复 制延伸 延伸至足够长度后，端粒酶脱离母链，代之以DNA-pol 母链3?-OH反折，同时起引物和模板作用， 在DNA-pol催化下完成末端的双链复制 AA C C C CAA C C C CAAC C C C AAC C C C AAC C C CAAC C C C 端粒 TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGG 5? 3? DNA AACC 3? HO- DNA聚合酶 DNA连接酶 5? 3? DNA 进一步加工 五、真核生物染色体DNA在每个细胞周期中只能复制一次 逆转录和其他复制方式 Reverse Transcription Other DNA Replication Ways 第五节 双链DNA是大多数生物的遗传物质。某些病毒的遗传物质是RNA。少数低等生物如M13噬菌体，它的感染型只含单链DNA。原核生物的质粒，真核生物的线粒体DNA，都是染色体外存在的DNA。这些非染色体基因组，采用特殊的方式进行复制。 逆转录酶(reverse transcriptase) 逆转录(reverse transcription) 逆转录酶 一、逆转录病毒的基因组是RNA，其复制方式是逆转录 RNA DNA 逆转录酶(reverse transcriptase) 也叫RNA指导的DNA聚合酶（RNA directed DNA polymerase) 逆转录病毒细胞内的逆转录现象: RNA 模板 逆转录酶 DNA-RNA 杂化双链 RNA酶 单链DNA 逆转录酶 双链DNA RNA病毒在细胞内复制成双链DNA的前病毒(provirus)。前病毒保留了RNA病毒全部遗传信息，并可在细胞内独立繁殖。在某些情况下，前病毒基因组通过基因重组(recombination)，参加到细胞基因组内，并随宿主基因一起复制和表达。这种重组方式称为整合(integration)。前病毒独立繁殖或整合，都可成为致病的原因。 分子生物学研究可应用逆转录酶，作为获取基因工程目的基因的重要方法之一，此法称为cDNA法。 以mRNA为模板，经逆转录合成的与mRNA碱基序列互补的DNA链。 试管内合成cDNA: cDNA ?complementary DNA? 逆转录酶 A AA A T T T T AAAA SI核酸酶 DNA聚合酶Ⅰ 碱水解 T T T T 二、逆转录的发现发展了中心法则 逆转录酶和逆转录现象，是分子生物学研究中的重大发现。 逆转录现象说明：至少在某些生物，RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能。 对逆转录病毒的研究，拓宽了20世纪初已注意到的病毒致癌理论。 滚环复制(rolling circle replication) 三、噬菌体DNA按滚环方式复制线粒体DNA按D环方式复制 是某些低等生物的复制形式，如?X174和M13噬菌体等。 3?-OH 5?-P 5? 5? 5? 3? 3? 3? 3? 5 滚环复制 5 ?? 5? 3? 3? 5? Protein A dNTP DNA-pol γ D环复制(D-loop replication) 是线粒体DNA (mitochondrial DNA，mtDNA)的复制形式。 D-环复制时需合成引物。mtDNA为双链，第一个引物以内环为模板延伸。至第二个复制起始点时，又合成另一个反向引物，以外环为模板进行反向的延伸。最后完成两个双链环状DNA的复制。复制中呈字母D形状而得名。 D环复制的特点是复制起始点不在双链DNA同一位点，内、外环复制有时序差别。 （二）复制的延长过程：领头链连续复制，随从链不连续复制 复制的延长指在D